一种盐角草室内培养的方法
阅读：336发布：2021-10-18
专利汇可以提供一种盐角草室内培养的方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 提供了一种盐 角 草室内培养的方法，属于 植物 种植技术领域。一种盐角草室内培养的方法，包括以下步骤：将洗净的盐角草 种子 浸泡2～3h后进行萌发培养得到 幼苗 ；将幼苗移栽至装有细沙基质的穴盘中，幼苗顶端露出基质进行幼苗培养；对1～4周龄幼苗开始浇灌含50～200mmol/LNaCl的1/2Hoagland 营养液 ，每2天浇灌一次所述营养液。本发明提供的培养方法，确定盐角草最适生长环境，可获得生长快速、长势良好的盐角草种苗，为进一步开发利用提供更便捷高效的途径。，下面是一种盐角草室内培养的方法专利的具体信息内容。
1.一种盐角草室内培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将洗净的盐角草种子浸泡2～3h后，进行萌发培养，得到幼苗；所述萌发培养的温度为23～27℃，湿度为55％～65％；所述萌发培养为暗培养；
2)将所述幼苗移栽至装有细沙基质的穴盘中，幼苗顶端露出基质，进行幼苗培养；
所述幼苗培养的白天温度为23～27℃，夜晚温度为20～24℃；所述幼苗培养时环境的相对湿度为60％～70％；所述幼苗培养伴随光照；所述光照的时间为15～18h/d；所述光照的强度为18000～22000Lux；
对1～4周龄幼苗开始浇灌含50～200mmol/L的NaCl的1/2Hoagland营养液，每2天浇灌一次所述营养液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述营养液中NaCl的浓度为
100mmol/L。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述1/2Hoagland营养液的配方为：2mmol/L KNO3、0.5mmol/L KH2PO4、0.5mmol/L MgSO4·7H2O、0.5mmol/L Ca(NO3)2·4H2O、
50μmol/L H3BO3、10μmol/L MnCl2·4H2O、1.6μmol/L ZnSO4·7H2O、0.6μmol/L CuSO4·5H2O、
0.05μmol/L Na2MoO4·2H2O和0.06mmol/L Fe-citrate·3H2O。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述穴盘中每穴移栽的幼苗棵树为1颗。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述幼苗培养的白天温度为25℃，夜晚温度为22℃；所述幼苗培养时环境的相对湿度为65％。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述光照的时间为16h/d；所述光照的强度为20000Lux。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述萌发培养在铺有两层润湿的滤纸的培养皿中进行。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述萌发培养的温度为25℃，湿度为60％。
9.根据权利要求1～8任意一项所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述盐角草种子为成熟、籽粒饱满、色泽金黄的盐角草种子。
一种盐角草室内培养的方法
技术领域
背景技术
[0002] 干旱和盐碱化是世界范围内限制作物生长和农业生产的两大主要非生物胁迫。在农业生态系统中，这两大胁迫经常共同发生，尤其在干旱和半干旱地区，因不合理灌溉引起的次生盐碱化现象尤为严重。旱生或盐生植物广泛地分布在干旱和半干旱地区，在长期的进化过程中，逐步形成了特殊的适应机制，其在农作物及优良牧草的遗传改良方面具有重要的应用价值。
[0003] 盐角草(Salicornia europaea)是我国西北地区盐碱地的优势种，是迄今已报道过最为耐盐的一种真盐生植物。在对盐渍化极端环境长期的适应中，盐角草的叶退化为鳞状，形成了发达的茎肉质化组织，来防止植株体内水分丧失，增加离子区域化能力。盐角草能将生境中大量的盐吸收至体内，并将其区域化在地上部的液泡中，维持正常生长，这一重要的耐盐基因供体可广泛应用于各种农作物和生态工程植物的耐盐性遗传工程改良工作及盐碱地的综合治理。对盐角草的开发利用具有十分重要的现实意义，发展前景广阔。
[0004] 目前，盐角草属盐角草的近缘种毕氏海蓬子(Salicornia bigelovii)已有大规模的商业化推广。而我国盐角草的野生资源由于种子质量较差，发芽率低，生长缓慢等问题，尚不能进行作物化生产，未见有规模化人工种植，室内培养方法也并不完善。
发明内容
[0005] 有鉴于此，本发明的目的在于提供一种盐角草室内培养的方法，确定它的最适生长环境，可获得生长快速、长势良好的盐角草种苗，为进一步开发利用提供更便捷高效的途径。
[0006] 本发明提供了一种盐角草室内培养的方法，包括以下步骤：
[0008] 2)将所述幼苗移栽至装有细沙基质的穴盘中，幼苗顶端露出基质，进行幼苗培养；
[0009] 所述幼苗培养的白天温度为23～27℃，夜晚温度为20～24℃；所述幼苗培养时环境的相对湿度为60％～70％；所述幼苗培养伴随光照；所述光照的时间为15～18h/d；所述光照的强度为18000～22000Lux；
[0010] 对1～4周龄幼苗开始浇灌含50～200mmol/L的NaCl的1/2Hoagland营养液，每2天浇灌一次所述营养液。
[0011] 优选的，步骤2)中所述营养液中NaCl的浓度为100mmol/L。
[0012] 优选的，步骤2)中所述1/2Hoagland营养液的配方为：2mmol/L KNO3、0.5mmol/L KH2PO4、0.5mmol/L MgSO4·7H2O、0.5mmol/L Ca(NO3)2·4H2O、50μmol/L H3BO3、10μmol/L MnCl2·4H2O、1.6μmol/L ZnSO4·7H2O、0.6μmol/L CuSO4·5H2O、0.05μmol/L Na2MoO4·2H2O和0.06mmol/L Fe-citrate·3H2O。
[0013] 优选的，步骤2)中所述穴盘中每穴移栽的幼苗棵树为1颗。
[0014] 优选的，步骤2)中所述幼苗培养的白天温度为25℃，夜晚温度为22℃；所述幼苗培养时环境的相对湿度为65％。
[0015] 优选的，步骤2)中所述光照的时间为16h/d；所述光照的强度为20000Lux。
[0016] 优选的，步骤1)中所述萌发培养在铺有两层润湿的滤纸的培养皿中进行。
[0017] 优选的，步骤1)中所述萌发培养的温度为25℃，湿度为60％。
[0018] 优选的，步骤1)中所述盐角草种子为成熟、籽粒饱满、色泽金黄的盐角草种子。
[0019] 本发明提供了一种盐角草室内培养的方法，采用本发明技术方案对盐角草进行室内培育，幼苗较未添加盐营养液的对照组幼苗相比生长迅速，苗健壮，肉质化程度高，大大缩短了幼苗生长时间，且又不受外界环境的干扰。因此，本发明提供了一种高效的盐角草室内培养方法，确定它的最适生长环境，可获得生长快速、长势良好的盐角草种苗，为进一步开发利用提供更便捷高效的途径。同时本发明提供的方法简单易行，可为开展盐角草的大规模推广提供重要的技术手段。附图说明
[0020] 图1为浇灌含不同浓度NaCl的营养液7d后盐角草的生长情况图；
[0021] 图2为浇灌含不同浓度NaCl的营养液7d后盐角草根和地上部的干鲜重柱形图；
[0022] 图3为浇灌含不同浓度NaCl的营养液7d后盐角草幼苗的肉质化程度图；
[0023] 图4为浇灌含不同浓度NaCl的营养液60d后盐角草幼苗的生长情况图；
[0024] 图5为浇灌含不同浓度NaCl的营养液60d后盐角草根和地上部的干鲜重柱形图；
[0025] 图6为浇灌含不同浓度NaCl的营养液60d后盐角草幼苗的肉质化程度图。
具体实施方式
[0026] 本发明提供了一种盐角草室内培养的方法，包括以下步骤：
[0027] 1)将洗净的盐角草种子浸泡2～3h后，进行萌发培养，得到幼苗；所述萌发培养的温度为23～27℃，湿度为55％～65％；所述萌发培养为暗培养；
[0028] 2)将所述幼苗移栽至装有细沙基质的穴盘中，幼苗顶端露出基质，进行幼苗培养；
[0029] 所述幼苗培养的白天温度为23～27℃，夜晚温度为20～24℃；所述幼苗培养时环境的相对湿度为60％～70％；所述幼苗培养伴随光照；所述光照的时间为16h/d；所述光照的强度为18000～22000Lux；
[0030] 对1～4周龄幼苗开始浇灌含50～200mmol/L的NaCl的1/2Hoagland营养液，每2天浇灌一次所述营养液。
[0031] 本发明将洗净的盐角草种子浸泡2～3h后，进行萌发培养，得到幼苗；所述萌发培养的温度为23～27℃，湿度为55％～65％；所述萌发培养为暗培养。
[0032] 在本发明中，所述盐角草种子优选为成熟、籽粒饱满、色泽金黄的盐角草种子。所述清洗优选采用蒸馏水进行；所述清洗的次数优选为3～5次，更优选为4次。所述萌发培养的温度优选为25℃，湿度优选为60％。所述萌发培养优选在铺有两层润湿的滤纸的培养皿中进行。本发明对所述的培养皿和滤纸没有特殊限制，均采用常规材料即可，例如玻璃培养皿的直径9cm，普通定性滤纸的直径9cm。所述萌发培养进行3d时得到发芽的幼苗。
[0033] 得到幼苗后，本发明将所述幼苗移栽至装有细沙基质的穴盘中，幼苗顶端露出基质，进行幼苗培养。
[0034] 在本发明中，所述营养液中NaCl的浓度优选为100mmol/L。所述1/2Hoagland营养液的配方优选为：2mmol/L KNO3、0.5mmol/L KH2PO4、0.5mmol/L MgSO4·7H2O、0.5mmol/L Ca(NO3)2·4H2O、50μmol/L H3BO3、10μmol/LMnCl2·4H2O、1.6μmol/LZnSO4·7H2O、0.6μmol/L CuSO4·5H2O、0.05μmol/LNa2MoO4·2H2O和0.06mmol/LFe-citrate·3H2O。本发明涉及到的原料或试剂均为普通市售产品，涉及到的操作如无特殊说明均为本领域常规操作。
[0035] 所述穴盘中每穴移栽的幼苗棵树优选为1颗。所述幼苗培养的白天温度优选为25℃，夜晚温度优选为22℃；所述幼苗培养时环境的相对湿度优选为65％。所述光照的时间优选为16h/d；所述光照的强度优选为20000Lux。每隔3天清洗一次穴盘。本发明对所述的穴盘的种类和规格没有特殊限制，采用本领域常规使用的穴盘即可，例如黑色塑料穴盘(5cm×5cm×5cm)。
[0036] 下面结合实施例对本发明提供的一种盐角草室内培养的方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
[0037] 实施例1
[0038] 1)挑选完全成熟、籽粒饱满、色泽金黄的盐角草种子，用蒸馏水清洗3次后，在蒸馏水中浸泡2h，将种子放入铺有两层滤纸的培养皿(直径9cm)中，滤纸事先用蒸馏水浸湿。将培养皿置于培养箱中恒温培养，25℃，湿度60％，无光照，每天添加蒸馏水保持滤纸湿润。暗室发芽3d后，将长势良好，发芽一致的幼苗移入装有灭菌细沙的穴盘中，1株/穴，种植时将幼苗基部放入细沙中，幼苗顶端露出细沙，小心操作避免弄断幼嫩组织。种植好的盐角草置于人工气候箱中进行培养。人工气候箱的昼夜温度为25℃/22℃，光照16h/d，光照强度约为20000Lux，相对湿度为65％。每2天浇灌1次含有50mM NaCl的1/2Hoagland营养液，每隔3天清洗塑料托盘，并更换新的营养液。
[0039] 持续浇灌1/2Hoagland营养液，并在生长至第37d(4周龄幼苗继续培养7d后)，90d(4周龄幼苗继续培养60d后)时拍照记录幼苗的生长情况，测定盐角草幼苗根和地上部的干鲜重、肉质化程度。
[0040] 实施例2
[0041] 1)挑选完全成熟、籽粒饱满、色泽金黄的盐角草种子，用蒸馏水清洗4次后，在蒸馏水中浸泡2.5h，将种子放入铺有两层滤纸的培养皿(直径9cm)中，滤纸事先用蒸馏水浸湿。将培养皿置于培养箱中恒温培养，27℃，湿度55％，无光照，每天添加蒸馏水保持滤纸湿润。
暗室发芽3d后，将长势良好，发芽一致的幼苗移入装有灭菌细沙的穴盘中，1株/穴，种植时将幼苗基部放入细沙中，幼苗顶端露出细沙，小心操作避免弄断幼嫩组织。种植好的盐角草置于人工气候箱中进行培养。人工气候箱的昼夜温度为25℃/20℃，光照16h/d，光照强度约为18000Lux，相对湿度为70％。每2天浇灌1次含有100mM NaCl的1/2Hoagland营养液，每隔3天清洗塑料托盘，并更换新的营养液。
暗室发芽3d后，将长势良好，发芽一致的幼苗移入装有灭菌细沙的穴盘中，1株/穴，种植时将幼苗基部放入细沙中，幼苗顶端露出细沙，小心操作避免弄断幼嫩组织。种植好的盐角草置于人工气候箱中进行培养。人工气候箱的昼夜温度为25℃/20℃，光照16h/d，光照强度约为18000Lux，相对湿度为70％。每2天浇灌1次含有100mM NaCl的1/2Hoagland营养液，每隔3天清洗塑料托盘，并更换新的营养液。
[0042] 持续浇灌1/2Hoagland营养液，并在生长至第37d(4周龄幼苗继续培养7d后)，90d(4周龄幼苗继续培养60d后)时拍照记录幼苗的生长情况，测定盐角草幼苗根和地上部的干鲜重、肉质化程度。
[0043] 实施例3
[0044] 1)挑选完全成熟、籽粒饱满、色泽金黄的盐角草种子，用蒸馏水清洗5次后，在蒸馏水中浸泡3h，将种子放入铺有两层滤纸的培养皿(直径9cm)中，滤纸事先用蒸馏水浸湿。将培养皿置于培养箱中恒温培养，23℃，湿度65％，无光照，每天添加蒸馏水保持滤纸湿润。暗室发芽3d后，将长势良好，发芽一致的幼苗移入装有灭菌细沙的穴盘中，1株/穴，种植时将幼苗基部放入细沙中，幼苗顶端露出细沙，小心操作避免弄断幼嫩组织。种植好的盐角草置于人工气候箱中进行培养。人工气候箱的昼夜温度为25℃/24℃，光照16h/d，光照强度约为22000Lux，相对湿度为60％。每2天浇灌1次含有200mM NaCl的1/2Hoagland营养液，每隔3天清洗塑料托盘，并更换新的营养液。
[0045] 持续浇灌1/2Hoagland营养液，并在生长至第37d(4周龄幼苗继续培养7d后)，90d(4周龄幼苗继续培养60d后)时拍照记录幼苗的生长情况，测定盐角草幼苗根和地上部的干鲜重、肉质化程度。
[0046] 对比例1
[0047] 本对比例与实施例1的区别在于：盐角草幼苗浇灌1/2Hoagland营养液生长至4周龄后，开始浇灌1/2Hoagland营养液。
[0048] 对比例2
[0049] 本对比例与实施例1的区别在于：盐角草幼苗浇灌1/2Hoagland营养液生长至4周龄后，开始浇灌含有300mMNaCl的1/2Hoagland营养液。
[0050] 实验例4
[0051] 本实验例对实施例1～3和对比例1～2所培育的盐角草幼苗的生长进行连续观察，4周龄苗分别浇灌不同浓度的盐营养液，分别在处理7d和60d后，对生长情况、生理指标进行统计，结果如下。
[0052] 图1～图3为采用不同营养液浇灌幼苗7d的结果。图1为浇灌含不同浓度NaCl的营养液7d后盐角草的生长情况。由图1可知，采用含50～200mMNaCl的营养液浇灌7d后，盐角草幼苗长势强壮，地上部分和根系部分长势均好，而浇灌不含NaCl的营养液或含300mM的NaCl的营养液的幼苗，植株相对较小，根系不发达。
[0053] 图2为浇灌含不同浓度NaCl的营养液7d后盐角草根和地上部的干鲜重柱形图。与浇灌不含NaCl的营养液或含300mM的NaCl的营养液的幼苗相比，浇灌含50～200mM的NaCl的营养液7d后的幼苗在根系和地上部分的干鲜重均有明显优势，说明浇灌含50～200mM的NaCl的营养液有利于幼苗的快速生长。
[0054] 图3为浇灌含不同浓度NaCl的营养液7d后盐角草幼苗的肉质化程度图。由图3可知，由浇灌不含NaCl和含NaCl浓度由低到高的营养液的幼苗，肉质化程度呈正态分布，其中浇灌含100mMNaCl的营养液的幼苗肉质化程度最高，其次为浇灌含50和200mMNaCl的营养液的幼苗，而浇灌不含NaCl的营养液或含300mMNaCl的营养液的幼苗肉质化程度最低。
[0055] 图4～图6为采用不同营养液浇灌幼苗60d的结果。图4为浇灌含不同浓度NaCl的营养液60d后盐角草幼苗的生长情况图。采用含50～200mMNaCl的营养液浇灌60d后，盐角草幼苗长势强壮，茎叶部分绿色，而浇灌不含NaCl的营养液或含300mMNaCl的营养液的幼苗，植株相对矮小，且茎叶发黄。
[0056] 图5为浇灌含不同浓度NaCl的营养液60d后盐角草根和地上部的干鲜重图。与不含NaCl的营养液相比，含NaCl的营养液浇灌幼苗后60d，盐角草根和地上部干鲜重呈显著性差异。图6为浇灌含不同浓度NaCl的营养液60d后盐角草幼苗的肉质化程度图。与不含NaCl的营养液相比，含NaCl的营养液浇灌幼苗后60d，肉质化程度呈显著差异。
[0057] 以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
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