一种二肽类化合物的应用
阅读：757发布：2021-01-21
专利汇可以提供一种二肽类化合物的应用专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种二肽类化合物的应用。所述二肽(Dipeptides)类化合物对核桃 炭疽病 菌(Gloeosporium fructigenum)具有较好抑制效果，最小抑制浓度(MIC)为64μg/mL，可用于制备农用 杀菌剂 ；所述Dipeptides类化合物的结构如式(一)所示。该化合物属于 微 生物 来源天然产物，相比较于传统的化学合成杀菌剂，在环境中易于降解，且易于规模化生产。，下面是一种二肽类化合物的应用专利的具体信息内容。
一种二肽类化合物的应用
技术领域
背景技术
[0002] 核桃在我国栽培历史悠久，含有丰富的蛋白质以及人体必需的钙、磷、铁等多种微量元素，具有健胃、补血、润肺、养神、延年益寿等功效。随着核桃的营养与药用价值逐渐被人们重视，其种植面积越来越大，但随之而来的是其病害发生越来越严重。核桃炭疽病作为主要病害之一，具有潜伏期长、发病时间短、爆发性强的特点，能够引起核桃成熟后期果实大量变黑，大大降低了核桃的产量。目前防治手段主要依靠波尔多液、多福锰锌、退菌特、多菌灵、百菌清等化学合成农药，虽然能够取得一定的防治效果，但也易于带来环境污染、农药残留超标等问题。与传统的化学合成农药相比，微生物来源杀菌剂具有对人畜和非靶标生物安全，环境兼容性好，不易产生抗性等优点。因此，微生物来源农药的开发与应用对人类健康、环境保护和农业的可持续发展具有重要的意义。
[0003] 式(一)所示的Dipeptides类化合物是由木霉菌发酵产物提取分离而获得(E Garo,CM Starks,PR Jensen,et al.Trichodermamides A and B,cytotoxic modified dipeptides from the marine-derived fungus Trichoderma virens[J].J.Nat.Prod.2003,66,423-426)，该文献通过实验证明：Trichodermamides B在体外抗人结肠癌HCT-116的效果显著，IC50为0.32微克/毫升，该文献没有公开Trichodermamides A and B的其他功能。
[0004]
发明内容
[0005] 本发明的目的是提供一种二肽(Dipeptides)类化合物的新应用。本发明通过实验证明其对核桃炭疽病菌具有较好抑制活性，最小抑制浓度(MIC)为64μg/mL。
[0006] 为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种二肽(Dipeptides)类化合物的应用，所述Dipeptides类化合物对核桃炭疽病菌(Gloeosporium fructigenum)具有较好抑制效果，可用于制备农用杀菌剂；所述Dipeptides类化合物的结构如为式(一)所示。
[0007]
[0008] 所述农用杀菌剂的剂型可以为可湿性粉剂、颗粒剂或缓释剂，以式(一)所示化合物为活性成分，加入农业上常用的助剂制备而成。
[0009] 本发明所具有的优点：式(一)所示化合物可由木霉菌经发酵培养、提取分离而获得，其对核桃炭疽病菌具有较好抑制活性，最小抑制浓度(MIC)为64μg/mL，表明该Dipeptides类化合物对核桃炭疽病菌具有较好抑制效果，可以作为具有杀菌作用的新农药成分或先导化合物。
具体实施方式
[0011] 为阐明对本发明特征的理解，下面结合一些非限定性的实施实例对本发明做进一步阐述。
[0012] 实施例1：
[0013] 式(一)所示的Dipeptides类化合物，为Dipeptides类已知化合物。式(一)所示的Dipeptides类化合物的制备过程可参见文献E Garo,CM Starks,PR Jensen,et al.Trichodermamides A and B,cytotoxic modified dipeptides from the marine-derived fungus Trichoderma virens[J].J.Nat.Prod.2003,66,423-426中的记载进行。
[0014] 实施例2：抑菌活性试验
[0015] 采用微量稀释法，测定式(一)所示化合物对核桃炭疽病菌(Gloeosporium fructigenum)的抑菌活性(《从天然产物到新农药创制-原理方法》，吴文君，2006，化学工业出版社)。
[0016] 1)菌悬液的制备
[0017] 将供试真菌核桃炭疽病菌(Gloeosporium fructigenum)接种于PDA培养基表面，于28℃培养72h后，吸取2mL无菌0.85％NaCl溶液(含0.25％吐温-20)洗涤培养物，并用玻璃刮刀将菌落轻轻刮下。吸取适量菌悬液于无菌试管中，调至0.5麦氏比浊(相当于1.5×108CFU/mL)备用。
[0018] 2)样品的配制
[0019] 分别取1mg待测样品(式(一)化合物)和阳性对照(两性霉素B)，溶解于100μL DMSO中，充分混匀后，吸取50μL样品溶液到另一只离心管中，接着加入50μL DMSO，得到浓度减半的样品溶液。按照此方法，得到12组浓度依次减半的样品溶液。
[0020] 3)MIC测定方法
[0021] (1)采用无菌操作，将倍比稀释后不同浓度的样品溶液分别加到无菌的96孔聚苯乙烯板中，第1至第12孔各加5μL的样品溶液，并以不加样品孔作为空白对照，加5μL DMSO溶液孔为溶剂对照。
[0022] (2)将相当于0.5麦氏比浊度的指示菌悬液，经沙氏培养基稀释1000倍后，取95μL依次加入到96孔板中，使得第1至第12孔的样品浓度依次为512、256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5和0.25μg/mL。以上所有样品均重复三次。轻轻震荡混匀后，将96孔板密封置于28℃生化培养箱中培养72h。
[0023] (3)在600nm波长下使用酶标仪测定每孔的吸光值，以在小孔内完全抑制指示菌生长的最低样品浓度为该化合物的MIC。(注意：当阴性对照孔内指示菌明显生长实验才有意义；当实验出现单一的跳孔时，应记录抑制菌株生长的最高药物浓度；如出现多处跳孔，则不应报告结果，需重复实验。)
[0024] 试验结果为式(一)所示化合物对核桃炭疽病菌(Gloeosporium fructigenum)的MIC值为64μg/mL，具有较好抑菌活性。
[0025] 上述实验结果证明本发明所涉及的化合物具有较好抑菌活性，可用于制备农用杀菌剂。
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