一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法
阅读：128发布：2021-04-14
专利汇可以提供一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种快速检测丝状 真菌 合成低聚果糖能 力 的平板显色方法，是将待测的丝状真菌和标准菌的新鲜孢子悬液点种于察氏固体培养基的平板上，各菌株孢子之间点种距离不小于2cm，30℃培养5h，将 葡萄糖 检测液直接倒在以上长有菌落的平板上，并使其均匀 覆盖 平板上的所有培养基表面，40℃静置10min，观察菌落周围形成的红色晕圈，比较待测菌株与标准菌株形成的红色晕圈的大小，若红色晕圈比标准菌株形成的大即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力强，若红色晕圈比标准菌株形成的小即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力弱。本发明方法操作简单，成本低廉，是一种简便、高效、可靠的适用于鉴定丝状真菌合成低聚果糖能力的方法，具有工业应用价值，值得推广。，下面是一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法专利的具体信息内容。
1.一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法，步骤是：
(1)将待测的丝状真菌新鲜孢子分别用无菌生理盐水稀释至1×107～108个/mL，制得丝状真菌孢子悬液备用；其中所述丝状真菌是：黑曲霉(Aspergillus niger)、塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)或棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)；同时，将工业用黑曲霉XG530菌株作为本检测丝状真菌合成低聚果糖能力平板显色方法的标准菌株，以相同实验条件制备孢子悬液备用；
(2)分别取步骤(1)制备的丝状真菌孢子悬液及标准菌株孢子悬液1μl，点种于察氏固体培养基的平板上，其中各菌株孢子之间点种距离不小于2cm，在30±3℃培养5～10小时；
(3)配制葡萄糖检测液，直接倒在步骤(2)培养后的长有菌落的平板上，并使其均匀覆盖平板上的所有培养基表面，然后40±5℃静置10～20min，观察菌落周围形成的红色晕圈，比较待测菌株与标准菌株形成的红色晕圈的大小，若红色晕圈比标准菌株形成的大即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力强，若红色晕圈比标准菌株形成的小即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力弱；其中，所述葡萄糖检测液的配方是：葡萄糖氧化酶(GOD)4～6U/ml，过氧化物酶(POD)0.2～0.4U/ml，4-氨基安替吡啉(4-AAP)0.1mg/ml，苯酚1mg/ml，琼脂粉
0.007g/ml。
2.根据权利要求1所述快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法，其特征在于，步骤(1)所述丝状真菌孢子悬液浓度为1×107个/mL。
3.根据权利要求1所述快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法，其特征在于，步骤(2)所述培养温度为30℃，培养时间为5小时。
4.根据权利要求1所述快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法，其特征在于，步骤(3)所述葡萄糖检测液的配方是：葡萄糖氧化酶(GOD)5U/ml，过氧化物酶(POD)
0.3U/ml，4-氨基安替吡啉(4-AAP)0.1mg/ml，苯酚1mg/ml，琼脂粉0.007g/ml。
一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法
技术领域
[0001] 本发明涉及检测丝状真菌合成低聚果糖能力的方法，属于检测技术领域。具体地说是涉及一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法。
背景技术
[0002] 低聚果糖(Fructo-oligosaccharides，简写为FOS)又称功能性果寡糖，是一种典型的益生元物质，广泛存在于洋葱、菊芋、香蕉、梨、小麦和蜂蜜等天然产物中，目前在国内外已被广泛地应用于药品、食品、保健品、饲料等产品的开发和生产中。其分子式为G-F-Fn(G为葡萄糖，F为果糖，n＝1～3)，是蔗糖分子上以β-1，2糖苷键结合数个D-果糖所形成的蔗果三糖(GF2)、蔗果四糖(GF3)、蔗果五糖(GF4)及其混合物的总称，结构式如下。
[0003]
[0004] 低聚果糖甜度是蔗糖的0.3-0.6倍，既保持了蔗糖的纯正甜味性质，又比蔗糖甜味清爽。低聚果糖具有重要的生理学功能：促进肠道益生菌如双歧杆菌的增殖、减少和抑制肠内腐败物质的产生、降低胆固醇和甘油三酯水平、促进人体内维生素B族合成及钙离子吸收等，同时又具有低热值、防龋齿、提高免疫力和抗病力等功能，所以近年来人们对低聚果糖的关注和需求与日俱增。
[0005] 人们对低聚果糖的大量需求，使得低聚果糖产业得以发展。但是天然蔬菜和水果中低聚果糖含量非常有限，不利于提纯和生产，因此，工业上一般采用具有低聚果糖合成酶活性(果糖基转移酶，Fructosyltransferase，FTase，EC 2.4.1.9；β-呋喃果糖苷酶，β-fructofuranosidase，Ffase，EC 3.2.1.26)的微生物进行发酵，以蔗糖为原料合成具有高附加值的低聚果糖。酶法合成过程中，一分子蔗糖作为供体，一分子蔗糖作为受体，酶作用于供体蔗糖断裂α-1，2糖苷键生成果糖基和葡萄糖，果糖基在转移酶作用下以β-1，2糖苷键形式连接到受体蔗糖分子上形成蔗果三糖，以此方式继续生成蔗果四糖和蔗果五糖，每添加一分子果糖基的同时释放出一分子葡萄糖。所以，葡萄糖含量的多少间接反映了微生物合成低聚果糖能力的强弱。相关文献报道，具有低聚果糖合成酶活性的微生物包括丝状真菌、酵母和细菌，其中具有低聚果糖合成酶活性的丝状真菌较为普遍，包括黑曲霉(Aspergillus niger)、日本曲霉(Aspergillus japonicus)、棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、出芽短梗霉(Aureobasium pullulans)等十几种，但其仅有少数几种产生的低聚果糖合成酶能够应用于工业上大量生产低聚果糖，因此，加快低聚果糖产业发展的研究重点是进一步筛选具有较高低聚果糖合成酶活性的优良丝状真菌。
[0006] 目前，检测和比较丝状真菌合成低聚果糖能力的方法主要有：3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)、薄层层析分离法(TLC法)和高效液相色谱法(HPLC法)等。这些方法操作过程复杂、耗时长且成本高(如色谱法)，大大减缓了工业用生产低聚果糖丝状真菌的筛选进程。所以，研发一种能够快速衡量丝状真菌合成低聚果糖能力的检测方法甚为关键。经检索，有关基于培养基平板并利用双酶法定性检测葡萄糖的产生而间接反映丝状真菌合成低聚果糖能力的检测方法在相关专利和文献中还未见报道。
发明内容
[0007] 针对现有技术述的不足，本发明的目的是提供一种快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法。
[0008] 本发明所述快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法，步骤是：
[0009] (1)将待测的丝状真菌新鲜孢子分别用无菌生理盐水稀释至1×107～108个/mL，制得丝状真菌孢子悬液备用；其中所述丝状真菌是：黑曲霉(Aspergillus niger)、塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)和/或棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)；同时，将工业用黑曲霉XG530菌株作为本检测丝状真菌合成低聚果糖能力平板显色方法的标准菌株，以相同实验条件制备孢子悬液备用；
[0010] (2)分别取步骤(1)制备的丝状真菌孢子悬液及标准菌株孢子悬液1μl，点种于察氏固体培养基的平板上，其中各菌株孢子之间点种距离不小于2cm，在30±3℃培养5～10小时；
[0011] (3)配制葡萄糖检测液，直接倒在步骤(2)培养后的长有菌落的平板上，并使其均匀覆盖平板上的所有培养基表面，然后40±5℃静置10～20min，观察菌落周围形成的红色晕圈，比较待测菌株与标准菌株形成的红色晕圈的大小，若红色晕圈比标准菌株形成的大即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力强，若红色晕圈比标准菌株形成的小即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力弱；其中，所述葡萄糖检测液的配方是：葡萄糖氧化酶(GOD)4～6U/ml，过氧化物酶(POD)0.2～0.4U/ml，4-氨基安替吡啉(4-AAP)0.1mg/ml，苯酚1mg/ml，琼脂粉0.007g/ml。
[0012] 上述快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法中，步骤(2)所述培养温度优选为30℃，培养时间优选为5小时。
[0013] 上述快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法中，步骤(3)所述葡萄糖检测液的配方优选是：葡萄糖氧化酶(GOD)5U/ml，过氧化物酶(POD)0.3U/ml，4-氨基安替吡啉(4-AAP)0.1mg/ml，苯酚1mg/ml，琼脂粉0.007g/ml。
[0014] 本发明所述的检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法是依据酶法合成低聚果糖的原理，在以蔗糖(葡萄糖-α-1,2-果糖)为底物催化生成低聚果糖时，每进行一次转糖基反应就会生成一分子葡萄糖(图2)，即葡萄糖的含量可间接地反映低聚果糖的生产量。因此，在以蔗糖为唯一碳源的菌体生长平板上利用双酶法定性检测葡萄糖含量可以间接反映菌体利用蔗糖和合成低聚果糖水平的强弱。双酶法的检测机理是：首先，利用葡萄糖氧化酶(GOD)将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，生成过氧化氢，然后，利用过氧化物酶(POD)将过氧化氢分解为水和氧，同时使色原性氧受体4-氨基安替吡啉(4-AAP)和苯酚去氢缩合为红色醌类化合物，所以菌落周围红色晕圈的大小直接反映了葡萄糖含量的高低。
[0015] 本发明所述的观察菌落周围形成的红色晕圈，比较待测菌株与标准菌株形成的红色晕圈的大小，若红色晕圈比标准菌株形成的大即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力强，若红色晕圈比标准菌株形成的小即可判定该待测菌株合成低聚果糖能力弱的结论进一步经3,5-二硝基水杨酸法(DNS)和薄层层析分离法(TLC)分析得以证实，根据测定果糖基转移酶活力和定性分析合成的低聚果糖成分、含量的结果表明，产红色晕圈大于标准菌株的待测丝状真菌对应的果糖基转移酶活力和合成低聚果糖的含量明显处于较高水平。
[0016] 本发明公开了一种基于培养基平板上利用双酶法定性检测葡萄糖的产生而间接反映丝状真菌合成低聚果糖能力的检测方法。该方法的有益效果是：此方法巧妙地将低聚果糖合成过程产生葡萄糖和酶法快速检测葡萄糖两方面结合，实现了在以蔗糖为唯一碳源的固体培养基上利用菌落产红色晕圈大小的不同进行低聚果糖合成菌株能力高低的比较，解决了现有检测技术中费时、工作量大、成本高的缺陷。
[0017] 本发明公开的方法快速、方便，具有较强的应用和推广价值，尤其是在工业用低聚果糖生产菌株的选育方面，可以快速的实现丝状真菌低聚果糖合成能力的比较，极大的缩短了高产低聚果糖丝状真菌的筛选进程，推动低聚果糖的工业化生产。附图说明
[0018] 图1.确立检测标准菌株合成低聚果糖能力的平板显色最佳时间
[0019] 其中：黑曲霉XG530设定为标准菌株，是一株低聚果糖工业生产菌株，图示为该菌株在察氏培养基上生长2h、5h、10h、24h和48h时检测葡萄糖产生红色晕圈的情况。
[0020] 图2.确立检测标准菌株合成低聚果糖能力的平板显色最佳孢子浓度
[0021] 其中：106、107、108、109表示标准菌株新鲜孢子的浓度(个/ml)。
[0022] 图3.标准菌株及其16株紫外诱变菌株检测葡萄糖产生红色晕圈图
[0023] 其中图a1和图a2是标准菌株XG530及其紫外诱变菌株的葡萄糖平板显色图，16株紫外诱变菌株分别编号A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9、A10、A11、A12、A13、A14、A15和A16；图b表示图a1、图a2中各丝状真菌产生红色晕圈的直径大小，横坐标表示XG530及其16株突变菌株的编号，纵坐标代表产生红色晕圈直径大小，单位为cm。
[0024] 图4.不同时间紫外照射条件下标准菌株XG530的存活率曲线。
[0025] 图5.3,5-二硝基水杨酸法(DNS)法测定丝状真菌果糖基转移酶活性的葡萄糖标准曲线。
[0026] 图6.标准菌株XG530及其紫外诱变菌株发酵培养48h时果糖基转移酶酶活
[0027] 其中：横坐标中发酵培养的菌株根据平板显色鉴定结果选择，A2、A3、A7、A11、A12、A13、A14和A16是红色晕圈直径明显大于标准菌株的诱变株，A6、A9、A15是红色晕圈直径小于标准菌株的诱变株；纵坐标表示菌株发酵培养48h时DNS法测定的果糖基转移酶酶活，单位U/g。
[0028] 图7.标准菌株XG530及其紫外诱变菌株发酵培养48h时合成低聚果糖的薄层层析(TLC)分析图
[0029] 其中蔗糖、葡萄糖为标品，XG530为标准菌株，A9为红色晕圈直径小于标准菌株的诱变株，A11和A16是红色晕圈直径明显大于标准菌株的诱变株。
[0030] 图8.待测低聚果糖合成菌株平板显色图及其相应红色晕圈直径大小
[0031] 其中所有待测菌株均是从山东星光糖业集团有限公司糖厂土壤中分离得到，编号T1和T2表示两株塔宾曲霉，J1、J2、J3表示三株棘孢曲霉；图a1是5株丝状真菌和标准菌的平板显色图，图a2是5株丝状真菌和标准菌产生红色晕圈的直径大小图，单位cm。
具体实施方式
[0032] 下面对本发明进行清楚、完整的描述，其目的是更好的理解本发明的内容，但不是以本实施例对发明保护范围造成限制。
[0033] 实施例1.低聚果糖合成丝状真菌的来源和活化生孢培养
[0034] 本实施例涉及的低聚果糖合成丝状真菌包括：黑曲霉(Aspergillus niger)XG530、黑曲霉XG530紫外诱变菌株、塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)和棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)；
[0035] 其中：黑曲霉XG530菌株作为本检测丝状真菌合成低聚果糖能力平板显色方法的标准菌株，其为目前低聚果糖工业常用生产菌株，购自山东星光糖业集团有限公司；塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)和棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)是从山东星光糖业集团有限公司糖厂内采集的土样中分离得到的能够合成低聚果糖的丝状真菌。
[0036] 所述黑曲霉XG530紫外诱变菌株是经紫外照射黑曲霉XG530孢子处理后分离得到的突变菌株，其紫外诱变的方法是：
[0037] 根据黑曲霉(A.niger)XG530紫外照射下的存活率情况(图4)，选择90s为紫外诱变最佳照射时间。取2mL浓度为1～2×106个/mL的新鲜孢子悬液打入平板内，轻轻摇晃使孢子悬液铺满整个平板，然后放到距离20W紫外灯下30cm处照射90s。将诱变好的孢子稀释1000倍至1～2×103个/mL，取孢子悬液100μL涂布到察氏固体培养基上，置于30℃恒温培养2～3天(在暗室中操作)。待突变株菌丝长出后，分别挑取至PDA固体培养基上，置于30℃培养箱培养生孢并分纯。
[0038] 丝状真菌的活化生孢培养：
[0039] 丝状真菌的活化生孢培养是将上述各种丝状真菌孢子分别接种于PDA固体培养基上，30℃培养4～5天，无菌生理盐水洗涤收集即获得丝状真菌的新鲜孢子。
[0041] 实施例2.确立检测标准菌株合成低聚果糖能力的平板显色最佳条件
[0042] A、最佳检测时间确定：取标准菌株黑曲霉XG530新鲜孢子，适当稀释至孢子浓度为1×107个/mL，取1μl点种于察氏固体培养基平板中心，以相同实验条件接种6～8个平板，30℃培养2h、5h、10h、24h和48h，分别取出倒入提前配制好的葡萄糖检测试剂，并使其均匀覆盖平板上的所有培养基表面，40℃放置10min后，观察并记录葡萄糖显色圈的大小，确定最佳检测时间。
[0043] 实验结果表明标准菌株培养5小时能够产生直径为0.5cm大小的红色晕圈，随着培养时间的延长，红色晕圈逐渐覆盖整个平板，如图1所示，为了便于比较，确定最佳检测时间为5h。
[0044] B、最佳检测孢子浓度确定：取标准菌株黑曲霉XG530新鲜孢子，适当稀释至孢子浓度为1×106、1×107、1×108、和1×109个/mL，分别取1μl点种于察氏固体培养基平板上，30℃培养5h，取出进行步骤A中同样实验条件操作，确定最佳检测孢子浓度。
[0045] 实验结果如图2，在上述检测时间条件下确定最佳检测孢子浓度为1×107个/mL。
[0046] 其中，上述葡萄糖检测试剂配方：葡萄糖氧化酶(GOD)5U/ml，过氧化物酶(POD)0.3U/ml，4-氨基安替吡啉(4-AAP)0.1mg/ml，苯酚1mg/ml，琼脂粉0.007g/ml。
[0047] 实施例3.快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力平板显色方法的效果评估
[0048] A、所用菌株
[0049] 标准菌株——黑曲霉XG530，待测菌株——黑曲霉XG530紫外诱变菌株，选择16株，分别编号为A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9、A10、A11、A12、A13、A14、A15和A16。
[0050] B、利用本发明所述平板显色方法检测16株诱变菌株低聚果糖的合成能力
[0051] 培养并收集上述标准菌株XG530及其16株诱变菌株的新鲜孢子(方法见实施例1)，，以相同实验条件制备孢子悬液计数并稀释至1×107个/mL，分别取1μl点种于察氏固体培养基平板中，不同菌株孢子之间点种距离应不小于2cm，30℃培养5h，取出倒入葡萄糖检测试剂，并使其均匀覆盖平板上的所有培养基表面，40℃放置10min后，观察菌落周围红色晕圈的大小。
[0052] 结果如图3所示，标准菌株产成直径为0.5cm的红色晕圈，与标准菌株相比，诱变菌株中A6、A9、A15红色晕圈直径在0.5cm以下，即可鉴定A6、A9、A15为低聚果糖合成能力较弱菌株；其余13株形成的红色晕圈明显大于0.5cm，尤其是诱变菌株A7、A11和A16，即可鉴定其为低聚果糖合成能力较强菌株。
[0053] C、进一步采用DNS法和TLC法验证鉴定的诱变菌株低聚果糖的合成能力
[0054] 根据平板显色的结果，选择上述鉴定中形成红色晕圈明显大于标准菌株的诱变株——A2、A3、A7、A11、A12、A13、A14和A16，和明显小于标准菌株的诱变株——A6、A9和A15，发酵培养48h，采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS法)测定果糖基转移酶活力和薄层层析法(TLC法)定性分析合成低聚果糖的含量。
[0055] DNS法实验方法如下：收集上述丝状真菌的新鲜孢子，计数后取适量接种至150ml发酵培养基中(500ml锥形瓶)，使得孢子终浓度为1×106个/mL，28℃，180rpm培养48h，抽滤收集菌丝，用去离子水洗涤后滤干，称取0.02克菌丝体与2ml 25％(W/V)蔗糖溶液(用0.1mol/L pH5.0的柠檬酸磷酸缓冲溶液配制)和2ml pH 5.0的磷酸缓冲液混合，50℃反应2小时，沸水浴5min终止反应，上述反应后上清糖液适当稀释，取1ml加入酶标管中，再加入DNS 2ml，煮沸2min，冷水冷却，加蒸馏水定容到25ml，摇匀，540nm测OD值。空白对照是直接取1ml蒸馏水与2ml DNS混匀进行同样实验条件操作。
[0056] 酶活定义：催化底物蔗糖每分钟反应产生1μmol的还原糖所需的酶量定为一个酶活力单位。
[0057] 其中上述发酵培养基配方：蔗糖30g/L，酵母膏3g/L，NaNO3 5g/L，K2HPO4 0.5g/L，MgSO4 7H2O 0.5g/L，FeSO4 0.01g/L，CuSO4 0.01g/L。
[0058] 其中上述葡萄糖标准曲线的制备采用相同的还原糖测定体系，标准曲线葡萄糖浓度在1g/L-10g/L之内，葡萄糖标准曲线如图8。
[0059] TLC法操作如下：取上述反应2h后的上清糖液，稀释20倍取1μl点样于铝箔层析硅胶板上，吹干水分，在经展开剂饱和的层析缸中层析，流动相流动至铝箔层析硅胶板前沿1cm处时，取出层析板吹干溶剂，侵入显色剂，在105℃干燥显色。根据显色后条带的位置和大小确定糖成分和含量。
[0060] 上述铝箔层析硅胶板型号是GF254，购自鼎国生物科技有限公司。
[0061] 上述展开剂组成：正丁醇：异丙醇：乙酸：水(v:v:v:v)＝7:5:2:4。
[0062] 上述显色剂组成：(苯胺-二苯胺-磷酸试剂)0.4mL苯胺、0.4g二苯胺、2mL 85％的磷酸、20mL丙酮(当天配制使用)。
[0063] 经DNS法测定和TLC分析，结果表明所鉴定的产红色晕圈直径大于标准菌株的诱变株具有较高的果糖基转移酶活力，如诱变株A11，发酵48h果糖基转移酶酶活达481U/g，是标准菌株(314U/g)的1.5倍(见图6)，转化产物中蔗糖含量减少，生成的低聚果糖含量明显增加(见图7)；鉴定的产红色晕圈直径小于标准菌株的诱变株发酵48h果糖基转移酶酶活力和合成低聚果糖含量明显较低。
[0064] 上述DNS法测定和TLC分析结果与平板显色检测结果相一致，进一步证明了本发明方法效果真实和确定性。
[0065] 实施例4.快速检测丝状真菌合成低聚果糖能力的平板显色方法的应用
[0066] 从山东星光糖业集团有限公司糖厂内的土壤中筛得5株丝状真菌，经形态学和分子生物学鉴定知，2株是塔宾曲霉(Aspergillus tubingensis)，编号T1、T2；3株是棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)，编号J1、J2和J3。采用本发明所述方法对该5株丝状真菌合成低聚果糖的能力进行检测。
[0067] 操作方法如下：
[0068] (1)分别收集5株丝状真菌的新鲜孢子制得浓度为1×107个/mL的孢子悬液，同时，将工业用黑曲霉XG530菌株作为本检测丝状真菌合成低聚果糖能力平板显色方法的标准菌株，以相同实验条件制备孢子悬液；分别取1μl孢子悬液点种于察氏固体培养基的平板上，其中各菌株孢子之间点种距离不小于2cm，30℃培养5小时。
[0069] (2)配制葡萄糖检测液，直接倒在步骤(1)培养后的生长有菌落的平板上，并使其均匀覆盖平板上的所有培养基表面，然后在40℃下静置10min。
[0070] 实验结果见图8，棘孢曲霉J1产生直径为1.2cm的红色晕圈，显著大于标准菌株，鉴定棘孢曲霉J1是合成低聚果糖能力较强的丝状真菌；塔宾曲霉T1、T2和棘孢曲霉J3产生直径为1cm的红色晕圈，鉴定低聚果糖合成能力较标准菌株强但相对棘孢曲霉J1弱；棘孢曲霉J2产生的红色晕圈直径大小与标准菌株相当，但晕圈颜色明显较弱，鉴定棘孢曲霉J2合成低聚果糖能力较弱。如此，利用本发明所述的平板显色方法，可实现对丝状真菌合成低聚果糖能力的进行快速鉴定。
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