一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法
专利汇可以提供一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种具有降 氨 氮能 力 的光合细菌的筛选方法，该菌株筛选于青岛胶南市大朱山嘴海域，具有较高的氨氮降解能力，生理生化鉴定为红假单胞菌属（Rhodopseudomonas）光合细菌。本发明还公开了降氨氮 海 水 光合细菌的筛选方法。将该菌株用于 水产养殖 水质改善及生活污水的处理，针对养殖 水体 或生活污水氨氮含量高的问题，针对性强，应用成本低。，下面是一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法专利的具体信息内容。
1.一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法，其特征在于：筛选步骤包括：
a、取样：泥水混合样取于青岛胶南市大朱山嘴海域，在低温下带回实验室；
b、富集培养基配制：1000 毫升海水加入：5克NH4Cl、1-5克CH3COONa、0.2克MgSO4·7H2O、0.2克酵母膏、0.1-0.3 克蛋白胨，调pH到7.0，121℃灭菌30min；
灭菌后加入： 5%的NaHCO3溶液加20毫升、5%的KH2PO4溶液4毫升；
c、富集：在无菌条件下接种10%泥水混合样于含有b所述培养基的锥形瓶中，用不透气-2 -1
橡胶塞密封，28℃±1℃静置培养，光照强度36µE·m ·s ，光暗比15h:9h，每天摇动混合一次；
培养7天后，取部分富集液按10%转接至新鲜的b培养基中，如上条件中再次富集培养
7天；
共转接三次获得最终富集液；
d、分离纯化培养基配制：1000 毫升海水加入0.1克NH4Cl，0.3 克CH3COONa，0.02 克MgSO4·7H2O，0.1克酵母膏，18克琼脂，pH值7.0, 121℃灭菌30min；
灭菌后加入0.2克 NaHCO3，0.02 克 K2HPO4；
e、分离纯化：在无菌环境下，移取1ml富集液于无菌培养皿中，倾注冷却至50-55℃的d所述培养基，缓慢摇匀，静置凝固；
再倾注一层上层培养基进行密封；
-2 -1
28℃±1℃静置培养，光照强度36µE·m ·s ，24h光照培养箱中培养，通过观察，挑取红色单菌落，重复在d所述培养基中进行划线分离，获得红假单胞菌属光合细菌。
2.根据权利要求1所述的具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法，其特征在于：所述步骤e中上层培养基为1000ml蒸馏水中加入18克琼脂、18克褐藻酸钠，121℃灭菌30min，冷却至50-55℃使用。
3.根据权利要求1所述的具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法，其特征在于：所述红假单胞菌属光合细菌应用于养殖水体或生活污水中，用量为：养殖水体
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1.2×10-10CFU/L水体时，48h氨氮降解率为96%，生活污水中10CFU/L-5×10CFU/L水体，72h氨氮降解率为68%。
一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法
技术领域
背景技术
发明内容
单胞菌属光合细菌，养殖水体用量为1.2×10-10CFU/L水体时，48h氨氮降解率为96%，生
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活污水中用量为10CFU/L-5×10CFU/L水体时，72h氨氮降解率为68%。
a、取样：泥水混合样取于青岛胶南市大朱山嘴海域，在低温下带回实验室；
b、富集培养基配制：1000 毫升海水加入：5克NH4Cl、1-5克CH3COONa、0.2克MgSO4·7H2O、0.2克酵母膏、0.1-0.3 克蛋白胨，调pH到7.0，121℃灭菌30min。灭菌后加入： 5%的NaHCO3溶液加20毫升、5%的KH2PO4溶液4毫升；
c、富集：在无菌条件下接种10%泥水混合样于含有b所述培养基的锥形瓶中，用不透气-2 -1
橡胶塞密封，28℃±1℃静置培养，光照强度36µE·m ·s ，光暗比15h:9h，每天摇动混合一次，培养7天后，取部分富集液按10%转接至新鲜的b培养基中，如上条件中再次富集培养7天。共转接三次获得最终富集液；
d、分离纯化培养基配制：1000 毫升海水加入0.1克NH4Cl，0.3 克CH3COONa，0.02 克MgSO4·7H2O，0.1克酵母膏，18克琼脂，pH值7.0, 121℃灭菌30min。灭菌后加入0.2克 NaHCO3，0.02 克 K2HPO4；
e、分离纯化：在无菌环境下，移取1ml富集液于无菌培养皿中，倾注冷却至50-55℃的d所述培养基，缓慢摇匀，静置凝固。再倾注一层上层培养基进行密封。28℃±1℃静置培-2 -1
养，光照强度36µE·m ·s ，24h光照培养箱中培养。通过观察，挑取红色单菌落，重复在d所述培养基中进行划线分离，获得一株红假单胞菌属光合细菌。
为：养殖水体1.2×10-10CFU/L水体时，48h氨氮降解率为96%，生活污水中10CFU/
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L-5×10CFU/L水体，72h氨氮降解率为68%。
附图说明
具体实施方式
b、富集培养基配制：1000 毫升海水（或者淡水加2%盐）加入：5克NH4Cl、1-5克CH3COONa、0.2克MgSO4·7H2O、0.2克酵母膏、0.1-0.3 克蛋白胨，调pH到7.0，121℃灭菌
30min。灭菌后加入： 5%的NaHCO3溶液加20毫升、5%的KH2PO4溶液4毫升。
28℃±1℃静置培养，光照强度36µE·m ·s ，24h光照培养箱中培养。通过观察，挑取红色单菌落，重复在d所述培养基中进行划线分离，获得一株红假单胞菌属光合细菌。
将筛选的红假单胞菌属光合细菌采用50L光照发酵罐罐进行规模培养至3×10CFU/L，生产培养基配方为：酵母膏2克/L，硫酸镁0.2克/L，乙酸钠2克/L，NaH2PO40.2克/L，-2 -1
NH4Cl 1克/L，121℃ 30min，灭菌后加NaHCO31克/L。日光灯光照强度为36µE·m ·s ，光暗比15h:9h，8h开搅拌机一次，转速80转/min，每次搅拌30min。发酵4天后，测定菌量为
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8×10CFU/ml。
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