技术领域
[0001] 本
发明具体涉及一种采用白及种子进行组培育种的技术。
背景技术
[0002] 白及,拉丁学名【Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.】,为兰科白及属
植物,
别名:白根、地螺丝、羊
角七。具有补
肺止血、消肿生肌等功能的常用中药。主治肺结核咳血、支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等症;外用治外伤出血、烧烫伤、手足皲裂等症。白及止血效果很好,用白及做的胶膜
块可用于肝脾手术贴在伤口处,代替血
钳子,效果非常好,具有快速凝血作用,多用于外科手术。主产于四川、
云南、陕西、甘肃等省,全国各地有栽培。
[0003] 白及多为野生,人工种植较少,主要是因为其很难通过种子繁殖进行大批量育苗,但白及作为名贵中药,近年来越来越多的应用到医药领域,目前的白及种植现状已不适应发展的需求;国内对白及的繁殖技术研究颇多。
[0004] 目前,现有的采用白及种子进行组培育种的技术不能实现工业化,培养基太单一,组培苗成活率较低,难以炼苗或移栽。
发明内容
[0005] 本发明要解决的技术问题是提供一种种子萌发率高,增殖倍数高,生根快、多、粗壮,移栽成活率高,容易实现工业化的采用白及种子进行组培育种的技术。
[0006] 为解决上述问题,本发明采用如下技术方案:
[0007] 一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.5mg/L、
蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L或者1/2MS、6-BA1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA3.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L或者MS+6-BA4.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖
30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、
活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
[0008] 所述的采用白及种子进行组培育种的技术,其特征在于:包括如下步骤:
[0009] 1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌
水冲洗4-5次,再用无菌
滤纸吸干果荚表皮水分,在超净
工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
[0010] 2)白及种子萌发培养:用无菌
镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养
温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0011] 3)增殖培养:将步骤2)诱导出的
幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0012] 4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0013] 5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
[0014] 6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的
土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,
灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色
地膜;
[0015] 7)田间管理:及时追肥,中耕除草,使用杀虫
杀菌剂防治地下
害虫和土传病害;所述
杀虫剂为0.06%噻虫胺颗粒剂,亩用量20-25kg;所述杀菌剂为15%恶霉灵水剂,亩用量300-500ml,滴管施药。
[0016] 本发明的有益效果是:由于采用诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,能够有效的提高了移栽成活率,减低培养基成本;由于只需经过白及种子萌发培养、增值培养和生根培养三个过程的控制,就可达到炼苗移栽,培养过程比较简单,且成活率高;同时易实现工业化生产,提高了白及资源
可持续性利用程度。
具体实施方式
[0018] 一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA3.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
[0019] 所述的采用白及种子进行组培育种的技术,其特征在于:包括如下步骤:
[0020] 1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌水冲洗4-5次,再用无菌滤纸吸干果荚表皮水分,在超净工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
[0021] 2)白及种子萌发培养:用无菌镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0022] 3)增殖培养:将步骤2)诱导出的幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0023] 4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0024] 5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
[0025] 6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色地膜;
[0026] 7)田间管理:及时追肥,中耕除草,使用杀虫杀菌剂防治地下害虫和土传病害;所述杀虫剂为0.06%噻虫胺颗粒剂,亩用量20-25kg;所述杀菌剂为15%恶霉灵水剂,亩用量300-500ml,滴管施药。
[0027] 实施例二:
[0028] 一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、6-BA1.0mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA4.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
[0029] 所述的采用白及种子进行组培育种的技术,包括如下步骤:
[0030] 1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌水冲洗4-5次,再用无菌滤纸吸干果荚表皮水分,在超净工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
[0031] 2)白及种子萌发培养:用无菌镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0032] 3)增殖培养:将步骤2)诱导出的幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0033] 4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0034] 5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
[0035] 6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色地膜;
[0036] 7)田间管理:及时追肥,中耕除草,使用杀虫杀菌剂防治地下害虫和土传病害;所述杀虫剂为0.06%噻虫胺颗粒剂,亩用量20-25kg;所述杀菌剂为15%恶霉灵水剂,亩用量300-500ml,滴管施药。
[0037] 实施例三:
[0038] 一种采用白及种子进行组培育种的技术,包括诱导培养基、增殖培养基和生根壮苗培养基,所述诱导培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述增殖培养基配方包括有:MS+6-BA4.0mg/L、NAA0.5mg/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8;所述所述生根壮苗培养基配方包括有:1/2MS、NAA0.4mg/L、IBA0.6mg/L、活性炭1.0g/L、蔗糖30g/L、琼脂5.5g/L,pH5.8。
[0039] 所述的采用白及种子进行组培育种的技术,包括如下步骤:
[0040] 1)引种:选取健壮、无病虫害危害的野生白及蒴果,先用75%的酒精表面消毒1min,再用0.1%的升汞消毒12min,之后用无菌水冲洗4-5次,再用无菌滤纸吸干果荚表皮水分,在超净工作台上用已经灭菌的手术刀把果荚从中切开,取出种子,备用;
[0041] 2)白及种子萌发培养:用无菌镊子将取出的种子均匀抖落在诱导培养基上,盖上瓶盖,做好标记后,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0042] 3)增殖培养:将步骤2)诱导出的幼苗接种到增殖培养基中,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0043] 4)生根培养:将步骤3)得到的高度达到2cm的白及增殖苗分为单株,接种到生根壮苗培养基中,放在培养室中光照培养,培养温度25℃,光照度2500lx,光照12h/d;
[0044] 5)炼苗:生根培养35-40天,待每株有须根8根以上时转移至自然环境中炼苗5-10天。
[0045] 6)移栽:将炼苗后的白及移栽到大田,大田的土壤条件为:有机质含量在20%以上,湿度为20-25%;交通便利,灌溉方便;移栽要求:带土移栽,移栽后盖黑色地膜;