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一种饲用高效复合益生菌剂及制备方法

阅读:42发布:2021-10-20

专利汇可以提供一种饲用高效复合益生菌剂及制备方法专利检索,专利查询,专利分析的服务。并且本 发明 公开了一种饲用高效复合 益生菌 剂及制备方法,属于 生物 技术领域。所述的复合益生菌剂由地衣芽孢杆菌(Bacilluslicheniformis)、嗜热乳酸链球菌(Streptococcusthermophilus)、酿酒 酵母 菌(SaccharomycescerevisiaeHansen)分别 发酵 培养后按比例混合而成,有效 微生物 数目达到8~120×108CFU/mL;所述复合益生菌剂菌株间配伍科学合理,能杀死或抑 制动 物体内的病原菌,促进 饲料 的消化吸收,能大大减少饲料中抗生素的使用。,下面是一种饲用高效复合益生菌剂及制备方法专利的具体信息内容。

1.一种饲用高效复合益生菌剂及制备方法,其特征在于复合益生菌剂是由地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、嗜热乳酸链球菌(Streptococcus thermophilus)、酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae Hansen)分别发酵培养后按比例混合而成。
2.如权利要求1所述的复合益生菌剂,其特征在于,所述地衣芽孢杆菌制剂制备方法如下:
在灭菌液体培养基上,按2%接种量接入活化的地衣芽孢杆菌,37℃通气发酵24小时,可得地衣芽孢杆菌制剂;
所述的液体培养基营养成分的质量体积比为:2%淀粉,1%豆饼解液,2%玉米浆,1%麸皮,磷酸氢二0.25%, 磷酸二氢钾 0.1%,121℃灭菌30 分钟;
所述的地衣芽孢杆菌,好生长,培养适温30~31℃;能分泌杆菌肽,具有广谱抗菌活性,能杀灭动物肠道内大肠杆菌、沙氏菌等病原菌 ;能够分泌蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等,促进饲料蛋白质等大分子物质的分解吸收;能够耐热、耐酸,在饲料加工过程中和在动物体内胃酸、胆汁酸盐的环境下,能保持较高的生理活性,容易培养。
3.如权利要求1所述的复合益生菌剂,其特征在于,所述嗜热乳酸链球菌制剂制备方法如下:
在灭菌的液体培养基中,以质量百分比5%接种量接入嗜热乳酸链球菌, 37℃静止培养24小时,可得嗜热乳酸链球菌制剂;
所述的液体培养基营养物质体积比为:40%麦芽水解液,10%大豆水解液,10%无机盐溶液Ⅱ,121℃灭菌30分钟;
所述的无机盐溶液Ⅱ是指1000ml溶液中含有醋酸钠5g、柠檬酸铵2g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g;
所述的嗜热乳酸链球菌,厌氧或兼性好氧,生长温度40~42℃,pH值5.5~6.2;在动物体内利用肠道内营养生长繁殖,与病原菌竞争营养物质,抑制病原菌生长繁殖;能够分泌乳链菌素,抑制和杀灭病原菌;代谢产生乳酸,乙酸,促进饲料中维生素D、离子的吸收,增加营养。
4.如权利要求1所述的复合益生菌剂,其特征在于,所述酿酒酵母菌菌制剂备方法如下:
在灭菌的固态培养基上,以10%接种量接入活化的酿酒酵母菌,30~32℃固体发酵
36~48小时,中间翻料2~3次,可得酵母菌制剂;
所述的固态培养基营养成分百分比为::40%苹果渣,10%麸皮,40%麦芽根,10%无机盐溶液Ⅰ,适量的水,混合均匀,121℃灭菌30分钟;
所述的无机盐溶液Ⅰ为:1000ml溶液中含有硫酸铵40g、磷酸氢二钾0.2g、硫酸二氢钾
0.8g、氯化钙0.02g、硫酸镁0.08g;
所述的酿酒酵母菌菌体蛋白质含量高,能够耐受动物肠道内胃酸和胆汁酸盐而存活;
在动物肠道内能够分泌嗜杀因子,杀灭肠道内的病原菌。
5.如权利要求1所述的复合益生菌剂,其特征在于,所述复合益生菌剂中益生菌比例为:地衣芽孢杆菌制剂30~50份,嗜热乳酸链球菌制剂30~50份,酿酒酵母菌制剂10~40份混合而成液体型菌剂;用麸皮或稻壳吸附干或40~50℃干燥可得益生菌固体型菌剂。
6.如权利要求书1所述的复合益生菌剂,其特征在于,所述复合益生菌剂中有效微生
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物含量为8~120×10 CFU/mL或6~150×10 CFU/g。
7.如权利要求书1所述的复合益生菌剂,其特征在于,所述复合益生菌剂可以
0.1~0.5%的剂量添加到畜禽饲料或饮用水中使用。

说明书全文

一种饲用高效复合益生菌剂及制备方法

技术领域

[0001] 本发明涉及一种饲料添加剂,尤其涉及一种由复合生物组成的高效复合益生菌剂。

背景技术

[0002] 在现代饲养业中,饲料中添加抗生素始于五十年代,对防治疾病,促进生长,节省饲料,提高养殖经济效益起到重要作用。但是,随着饲料中长期大量地添加抗生素及化学合成药物,在养殖生产中出现了动物体内病原微生物产生耐药性,应用效果降低,生产成本加大;动物体内产生药物依赖,自身的免疫机能抑制,免疫和抗病力降低;动物体内有益菌被抑制,菌群失调,形成内源性感染;动物产品及排泄物药物残留,危及人体健康;动物体内耐药菌的扩散,引起公共安全等重大问题,亟待解决。
[0003] 因此,从八十年代始,有关益生菌在养殖业的应用研究快速发展。目前,国内外益生菌研究涉列有益菌80余个品种。我国颁布的《饲料添加剂品种目录(2006)》准予使用有益菌共16个。国内市场推广的芽孢杆菌制剂有促菌生、整肠生、抑菌生、乳康生等;乳酸菌制剂以乳酸菌属和双歧杆菌属为主。益生菌作为一种新型天然的生物活性添加剂,无毒,无抗药性,无残留,并具有增强免疫力,促进生长,提高饲料利用率的功效,替代抗生素应用养殖生产中。
[0004] 目前,益生菌制剂应用于养殖生产,但在制备技术方面尚存在诸多问题:(1)产品标准不统一,生产企业自行设立标准,缺乏科学依据,益生菌含量过高或过低,影响使用效果;(2)生产菌种来源不明,大多数企业生产用菌种相互转接,没有经过分离选育,菌种退化严重,生理活性降低;(3)菌种配伍缺乏科学依据,单一菌株,双菌株,甚至多菌株随意配比,不能说明菌株间配伍的合理性,达不到菌株优良性状,通过合理配伍而互补,协同性差;(4)生产工艺混乱,不能按菌种的不同生理特性区别培养,不少生产企业采用多菌种混合培养,不用发酵罐,甚者采用堆集发酵,致使益生菌生长少,杂菌丛生。

发明内容

[0005] 为了解决以上益生菌制剂存在的配伍不科学、协同效果差的问题,本发明提供了一种配伍科学合理、相互协同作用效果好的高效复合益生菌制剂。
[0006] 本发明的另一个目的是提供所述高效复合益生菌制剂的制备方法。
[0007] 本发明所述的复合益生菌剂是由地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、嗜热乳酸链球菌(Streptococcus thermophilus)、酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae Hansen)分别发酵培养后按比例混合而成。
[0008] 所述地衣芽孢杆菌剂制备方法如下:(1)地衣芽孢杆菌制剂
地衣芽孢杆菌菌剂制备方法如下:
在灭菌液体培养基上,按2%接种量接入活化的地衣芽孢杆菌,37℃通气发酵24小时,可得地衣芽孢杆菌制剂;
所述的液体培养基营养成分的质量体积比为:2%淀粉,1%豆饼解液,2%玉米浆,1%麸皮,磷酸氢二0.25%, 磷酸二氢钾 0.1%,121℃灭菌30分钟;
所述的地衣芽孢杆菌,好生长,培养适温30~31℃;能分泌杆菌肽,具有广谱抗菌活性,能杀灭动物肠道内大肠杆菌、沙氏菌等病原菌 ;能够分泌蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶等,促进饲料中蛋白质等大分子物质的分解吸收;能够耐热、耐酸,在饲料加工过程中和在动物体内胃酸、胆汁酸盐的环境下,能保持较高的生理活性,容易培养。
[0009] (2)嗜热乳酸链球菌制剂嗜热乳酸链球菌剂制备方法如下:
在灭菌的液体培养基中,以质量百分比5%接种量接入嗜热乳酸链球菌, 37℃静止培养24小时,可得嗜热乳酸链球菌制剂;
所述的液体培养基营养物质体积比为:40%麦芽水解液,10%大豆水解液,10%无机盐溶液Ⅱ,121℃灭菌30分钟;
所述的无机盐溶液Ⅱ是指1000ml溶液中含有醋酸钠5g、柠檬酸铵2g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g;
所述的嗜热乳酸链球菌,厌氧或兼性好氧,生长温度40~42℃,pH值5.5~6.2;在动物体内利用肠道内营养生长繁殖,与病原菌竞争营养物质,抑制病原菌生长繁殖;能够分泌乳链菌素,抑制和杀灭病原菌;代谢产生乳酸,乙酸,促进饲料中维生素D,离子的吸收,增加营养。
[0010] (3)酿酒酵母菌制剂酿酒酵母菌菌剂制备方法如下:
在灭菌的固态培养基上,以10%接种量接入活化的酿酒酵母菌,30~32℃固体发酵
36~48小时,中间翻料2~3次,可得酵母菌制剂;
所述的固态培养基营养成分百分比为::40%苹果渣,10%麸皮,40%麦芽根,10%无机盐溶液Ⅰ,适量的水,混合均匀,121℃灭菌30分钟;
所述的无机盐溶液Ⅰ为:1000ml溶液中含有硫酸铵40g、磷酸氢二钾0.2g、硫酸二氢钾
0.8g、氯化钙0.02g、硫酸镁0.08g;
所述的酿酒酵母菌菌体蛋白质含量高,能够耐受动物肠道内胃酸和胆汁酸盐而存活;
在动物肠道内能够分泌嗜杀因子,杀灭肠道内的病原菌。
[0011] (4)复合益生菌剂制备复合益生菌剂制备方法为:地衣芽孢杆菌制剂30~50份,嗜热乳酸链球菌制剂30~50份,酿酒酵母菌制剂10~40份混合而成液体型菌剂;用麸皮或稻壳吸附干或40~50℃干燥可得益生菌固体型菌剂。
[0012] 所述复合益生菌剂中有效微生物含量为8~120×109 CFU/mL或6~150×109 CFU/g所述复合益生菌剂可以0.1~0.5%的剂量添加到畜禽饲料或饮用水中使用。
[0013] 本发明的优点在于:(1)分离筛选的菌种生理活性高,菌株间配伍的科学合理,菌株优良性状通过合理配伍而互补,协同性好,使动物体内有益微生物菌群平衡,能抑制和杀灭动物体内病原菌,逐渐取代饲料中添加的抗生素;
(2)在动物体内益生菌分泌的杆菌肽、乳酸链球菌素及嗜杀因子,均为基因编码的肽类,而非菌类培养的次生物,在动物体内通过代谢自行分解为基酸等被吸收,无毒、无残留;
(3)根据每个菌株的生理特点,改进培养方法,培养过程中特别是地衣芽孢杆菌不容易感染噬菌体,适用工业化生产;
(4)促进动物消化吸收,减轻粪便臭味,改善饲养环境和生态环境。

具体实施方式

[0014] 为了更好的理解本发明,下面结合具体实施例来进一步说明。
[0015] 实施例1:高效复合益生菌剂—液体型(1)地衣芽孢杆菌菌剂的制备:
液体培养基(W/V):2%淀粉,1%豆饼水解液,2%玉米浆,1%麸皮,磷酸氢二钾0.25%, 磷酸二氢钾 0.1%,121℃灭菌30分钟。
[0016] 在灭菌培养基上,2%接种量接入活化的地衣芽孢杆菌,37℃通气发酵24小时,可得地衣芽孢杆菌制剂。
[0017] (2)嗜热乳酸链球菌剂的制备:液体培养基(W/V):40%麦芽水解液,10%大豆水解液,10%无机盐溶液Ⅱ(1000ml溶液中含有醋酸钠5g、柠檬酸铵2g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g),121℃灭菌30分钟。
[0018] 在灭菌的培养基中,以5%(重量百分比)接种量接入嗜热乳酸链球菌, 37℃静止培养24小时,可得嗜热乳酸链球菌制剂。
[0019] (3)酿酒酵母菌菌剂的制备:固体培养基(W/W):40%苹果渣,10%麸皮,40%麦芽根,10%无机盐溶液Ⅰ(1000ml溶液中含有硫酸铵40g、磷酸氢二钾0.2g、硫酸二氢钾0.8g、氯化钙0.02g、硫酸镁0.08g),适量的水,混合均匀,121℃灭菌30分钟。
[0020] 在灭菌的培养基上,以10%接种量接入活化的酿酒酵母菌,30~32℃固体发酵36~48小时,中间翻料2~3次,可得酵母菌制剂。
[0021] 将上述培养好的活菌制剂,按照地衣芽孢杆菌40份、嗜热乳酸链球菌40份、酿酒8
酵母菌20份的比例混合,即得液体剂型益生菌剂,有效活菌数达到74×10 CFU/mL。
[0022] 实施例2:高效复合益生菌剂—固体型按实施例1方法制得液体型复合益生菌菌剂,和麸皮1:3混合,45℃干燥后即得固体型
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益生菌制剂,有效活菌数达到67×10 CFU/mL。
[0023] 实施例3:肉鸡饲喂试验实验选用1日龄AA肉仔鸡23158只,随机分为试验组、对照组两组。鸡群基础日粮相同,按正常程序免疫接种。对照组11610只,饲喂基础日粮中按常规添加抗生素,试验组
11548只,基础日粮中添加1wt%实施例1制得的高效益生菌制剂。整个试验于21日龄、42日龄分别秤重统计。试验结果为:试验组仔鸡成活率92.21%,对照组为90.99%,成活率提高
1.22%;平均料重比,试验组2.027,对照组2.161,料重比下降0.134,试验组饲料转化率提高。
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