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用于治疗或预防癌症和肿瘤的麦芽酚 铁组合物

阅读：560发布：2023-03-07

专利汇可以提供用于治疗或预防癌症和肿瘤的麦芽酚铁组合物专利检索，专利查询，专利分析的服务。并且公开了用于治疗或预防癌症和肿瘤的麦芽酚铁组合物的用途，具体地用于治疗或预防如大肠癌(结肠直肠)、小肠癌或上消化道癌等胃肠癌或胃肠肿瘤的麦芽酚铁组合物的用途。，下面是用于治疗或预防癌症和肿瘤的麦芽酚铁组合物专利的具体信息内容。

权利要求

1.一种用于在用于治疗和/或预防受试者的胃肠癌和胃肠肿瘤的方法中使用的麦芽酚铁组合物。
2.根据权利要求1所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的组合物，其中所述受试者是人。
3.根据权利要求1所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的组合物，其中所述受试者是非人动物。
4.根据权利要求1到3中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的组合物，其中所述麦芽酚铁组合物包括三麦芽酚铁。
5.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中配制所述麦芽酚铁以口服施用给所述受试者。
6.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述组合物用于治疗所述受试者的胃肠癌或胃肠肿瘤。
7.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述胃肠癌是结肠直肠癌或肿瘤、小肠癌或肿瘤、或上消化道癌或肿瘤。
8.根据权利要求7所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述胃肠癌是结肠肿瘤和/或直肠肿瘤或胃肿瘤。
9.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述麦芽酚铁组合物被配制为片剂或胶囊。
10.根据权利要求9所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述片剂或所述胶囊包括用于将所述麦芽酚铁引导到小肠或大肠的包衣。
11.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述麦芽酚铁组合物被配制为片剂或胶囊，所述片剂或所述胶囊包括时间释放包衣和/或pH依赖性释放包衣和/或响应于细菌存在的包衣。
12.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述组合物是与外科手术、放射疗法、化学疗法、免疫疗法和/或天然产物疗法组合施用的。
13.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述组合物用于预防癌症或预防所述受试者中的肿瘤形成或生长。
14.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述受试者是贫血的或缺铁的或有贫血或缺铁风险的或需要补铁的。
15.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述组合物包括作为麦芽酚铁的3mg/剂量到201mg/剂量的铁、优选地
5mg/剂量到100mg/剂量、更优选地10mg/剂量到70mg/剂量、以及最优选地18mg/剂量到
65mg/剂量。
16.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述组合物一天施用一次、两次、三次或四次。
17.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述麦芽酚铁组合物以非口服方式递送。
18.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述麦芽酚铁组合物是经直肠递送的。
19.根据前述权利要求中任一项所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述麦芽酚铁组合物通过静脉、经皮或胃肠外递送。
20.根据权利要求19所述的用于在用于治疗或预防癌症的方法中使用的麦芽酚铁组合物，其中所述麦芽酚铁组合物经由管道或内窥镜递送。
21.一种根据权利要求1到20中任一项所限定的用于制造用于治疗和/或预防受试者的胃肠癌或胃肠肿瘤的药剂的麦芽酚铁组合物的用途。
22.一种治疗和/或预防受试者的胃肠癌或胃肠肿瘤的方法，所述方法包括将治疗有效或预防有效量的根据权利要求1到20中任一项所限定的麦芽酚铁组合物施用给所述受试者。

说明书全文

用于治疗或预防癌症和肿瘤的麦芽酚 铁组合物

技术领域

[0001] 本发明涉及用于治疗或预防癌症和肿瘤的麦芽酚铁组合物的用途，以及具体地用于治疗或预防如大肠癌(结肠直肠)、小肠癌或上消化道癌等胃肠癌或胃肠肿瘤的麦芽酚铁组合物的用途。

背景技术

[0002] 口服铁补剂被认为是预防或治疗人类和其它动物缺铁和相关联的贫血的主要手段之一。铁是一种氧化还原活性元素并且在其还原的(Fe2+，称为铁)与氧化的(Fe3+，称为三价铁)形式之间发生变化，它诱导然后可能损伤组织的自由基。以此方式，传统上认为，简单1 2
的铁盐在口服递送 '时可能导致胃肠道副作用。鉴于这点，已研发出不同的铁化合物。使用螯合铁是改进铁环境使得其在肠腔中可溶解并且因此被吸收，并且免受氧化还原活性，并且因此减少如恶心、呕吐、胃肠痛等急性副作用的一种方式。可以以此方式使用的螯合铁的实例为柠檬酸铁、铁EDTA和麦芽酚铁。

[0003] 然而，已确定的是，某些形式的螯合铁，即柠檬酸铁和铁EDTA，增加了至少动物模型3'4患肠癌的可能性。这并不奇怪，因为大多数补充铁是不被吸收的。甚至对于患缺铁性贫血的患者而言，来自口服铁补充剂的小于50％的铁将不被吸收。剩余铁将横穿肠道并且通过粪便排泄出来。由于这些螯合剂旨在使铁可溶于胃肠腔中以便在近端肠和中小肠中吸收，因此还应该期望它们使至少一些铁可用于远段肠中的细胞摄取。远端肠，具体地大肠，是人体肠肿瘤发生的主要部位，并且已确定具有恶性潜能或表型的细胞需要铁以生长和存活。

[0004] 因此，为结肠中的细胞仍可生物利用的补充铁具有增加肿瘤发生3'4的潜能。类似地，在肠内但远离大肠的其它地方找到更罕见的恶性或恶变前细胞，预期生物可利用的铁会增强其致瘤潜能。

发明内容

[0005] 广义上说，本发明基于发明人的如下洞悉：不同形式的口服铁补充剂对胃肠道的癌细胞产生不同的影响，具体地，与对胃肠癌细胞有益(友好)的其它形式的补充铁相反，麦芽酚铁对胃肠癌细胞是有害的(不友好的)。通常估计人体中的口服铁补充物会导致管腔内铁浓度达到50到200微摩尔(参见，例如Mergler等人，《药学和营养科学杂志(Journal of Pharmacy and Nutrition Sciences,)》，2012年，第2期，第27到34页)。本发明是基于这一发现，在一系列的三种不同的肠上皮癌细胞系中并且在两种不同的细胞培养条件下，预期在具有铁补充物的肠腔中发生的浓度下柠檬酸铁、EDTA铁和常用的铁补充剂、硫酸亚铁都促进细胞增殖。相比之下，并且令人惊讶的是，在典型的铁补充水平下，本发明示出麦芽酚铁抑制经过测试的所有癌症细胞系中的癌细胞增殖。这意味着，除了其补充用途外，麦芽酚铁组合物可以用于治疗或预防癌症或肿瘤，尤其是胃肠道癌症或肿瘤，如结肠直肠癌或肿瘤(在此包含影响大肠的所有癌症或肿瘤，例如肛门、直肠、结肠、和盲肠的那些癌症或肿瘤)、小肠癌或肿瘤(在此包含影响十二指肠、空肠或回肠的癌症或肿瘤)、或上消化道区域的癌症或肿瘤(在此包含影响胃、食道、或口腔的癌症或肿瘤)。术语胃肠癌或肿瘤包含可以由本领域技术人员如专科医生和外科医生判断为以下病症的胃肠组织或胃肠组织区域：癌前、有癌症风险、癌性或带瘤。它包含肠的各种括约肌和与胰/肝胆系统的相互作用并且包含原发性或非原发性本质但在胃肠区域中具有一些位置的癌症或肿瘤。

[0006] 在本文中描述的作为未络合的麦芽酚，即，不与铁结合，尤其令人惊讶的结果示出中度抑制癌细胞增殖，并且在此方面，当不与铁结合时非常类似于EDTA的效果。然而，尤其令人惊讶的是，虽然EDTA效果实际上通过其与铁结合而减弱，但是麦芽酚作用增强。换句话说，当与铁结合时，用于补铁的这两种螯合物在其癌细胞抑制特性方面显示出极性效应。

[0007] 因此，以上数据不仅告知有胃肠(GI)癌风险或患有GI癌的患者对口服铁补充剂的选择，而且它们在仍有益地递送铁的同时提供用于治疗或预防GI肿瘤的方法。在此后一种情况下，铁可以是设计成针对肠中靶向递送的口服制备，如使用肠溶衣引导到小肠或使用时间释放或响应于pH值或细菌等的包衣引导到大肠。麦芽酚铁的两亲性质支持其在肠道中任何地方被吸收。

[0008] 相应地，在第一方面，本发明提供了一种用于在用于治疗和/或预防受试者的胃肠癌和胃肠肿瘤的方法中使用的麦芽酚铁组合物。

[0009] 在另一方面，本发明提供了一用于制造用于治疗和/或预防受试者的胃肠癌或胃肠肿瘤的药剂的麦芽酚铁组合物的用途。

[0010] 在另一方面，本发明提供了一种治疗和/或预防受试者的胃肠癌或胃肠肿瘤的方法，所述方法包括将治疗有效或预防有效量的如在本文中限定的麦芽酚铁组合物施用给所述受试者。

[0011] 在另一方面，本发明可以用于治疗有患胃肠癌或胃肠肿瘤风险的患者患缺铁(贫血)(风险)。

[0012] 现在将通过举例的方式并且非限制性地参考附图来描述本发明的实施例。然而，鉴于本公开，本发明的各个另外方面和实施例对本领域技术人员而言将是显而易见的。

[0013] 在此使用的“和/或”应当理解为具体地公开了两个具体特征或部件中的每一个(具有或不具有另外一个)。例如，“A和/或B”应当理解为具体地公开了(i)A、(ii)B和(iii)A和B中的每一种情况，就像每一种情况在此单独地陈述一样。

[0014] 除非上下文中另外指出，否则上述列出的特征的描述和定义并不限于本发明的任何特定方面或实施例，并且等同地应用于所述的所有方面和实施例。

附图说明

[0015] 图1：如由实时活细胞成像(IncucyteTM)评估的，用不同的铁化合物来抑制Caco2人上皮结肠直肠腺癌细胞系中的细胞增殖。在含有5％FBS(A)或10％FBS(B)的完全生长培养基中用指定的铁化合物处理细胞72小时，图C和图D中示出相应的“仅配体”对照。标准化的细胞增殖率对应于针对在补充有每种化合物的培养基中生长的细胞的增殖曲线下的面积除以针对仅在培养基(即，没有任何补充化合物)中生长的细胞的曲线下的面积。数据被呈现为SEM的平均值(n＝3次独立实验，每次实验重复3次)。

[0016] 图2：如由实时活细胞成像(IncucyteTM)评估的，用不同的铁化合物抑制Hutu 80人上皮十二指肠腺癌细胞系中的细胞增殖。在含有5％FBS(A)或10％FBS(B)的完全生长培养基中用指定的铁化合物处理细胞72小时，图C和图D中示出相应的“仅配体”对照。标准化的细胞增殖率对应于针对在补充有每种化合物的培养基中生长的细胞的增殖曲线下的面积除以针对仅在培养基(即，没有任何补充化合物)中生长的细胞的曲线下的面积。数据被呈现为SEM的平均值(n＝2次独立实验，每次实验重复3次)。

[0017] 图3：如由实时活细胞成像(IncucyteTM)评估的，用不同的铁化合物抑制HT29人上皮结肠直肠腺癌细胞系中的细胞增殖。条件同上图2中的图例。

具体实施方式

[0018] 麦芽酚铁组合物及其用途

[0019] 麦芽酚铁是通常具有包围中心铁原子的三个麦芽酚(3-羟基-2-甲基-4-吡喃酮)分子的螯合铁的一种形式(三麦芽酚铁(ferric trimaltol)，或者也被写成三-麦芽酚铁(ferric tri-maltol))。因此，三麦芽酚铁是在三价铁(Fe3+)与羟基吡喃酮、麦芽酚(IUPAC名称：3-羟基-2-甲基-4H-吡喃酮-4-酮)之间形成的化学络合物，其中三价铁与麦芽酚的摩尔比率是3:1。它可以被具体地合成为3:1的摩尔络合物，或者可以在溶液中以三个或更多个麦芽酚与一个铁的摩尔比率通过混合而成。然而，众所周知，当溶解在水性环境(包含肠道)中时，可能存在形成的其它浓度依赖性和pH依赖性平衡物类，包含如二聚体等低聚物或具有一个或两个麦芽酚分子的铁物类。呈固体或粉状形式的三麦芽酚铁还可以作为包含二聚物的低聚物存在，并且并非每个铁必定与三个麦芽酚分子配位，但是术语三-麦芽酚铁通常被用于本领域。相应地，在本申请中，参考“麦芽酚铁”旨在包含与一个、两个或三个麦芽酚物类以及如二聚物等低聚合物物类和可以与其均衡存在的其它物类络合的三价铁物类以及这些物类的任一种的混合物，即使络合物的行为被认为以补充水平5,6下的三麦芽酚为主导。所述络合物具有两亲性，并且因此能够溶于水性环境(如肠腔)，但然后也进入富脂质细胞层中。因此，期望具有良好的生物利用度，并且例如在包含患有炎症性肠病的患者的许多研究中已示出这种良好的生物利用度，其中麦芽酚铁有效地递送以校正缺铁性贫血7。此外，由于其两亲特性，期望麦芽酚铁将在一定程度上在肠道内的任何地方被吸收。

[0020] 麦芽酚与铁强烈螯合。由于所有这些原因，与许多其它三价铁疗法相比，所产生的麦芽酚铁络合物(尤其是三麦芽酚铁)提供更好吸收的铁的形式。WO 2015/101971(Iron Therapeutics Holdings AG)中展示了三麦芽酚铁的结构。三麦芽酚铁也称为“ST10”，并且通常作为30mg的剂量施用，其中30mg是指铁的剂量，但等同地可以以更低剂量如20mg或更高剂量如60mg施用。等同于30mg的元素铁(Fe3+)的ST10的量为231.5mg。三麦芽酚铁前进到治疗或预防具体地患有炎症性肠病(IBD)的患者或患有不耐受其它铁补充剂的患者的缺铁性贫血的临床试验。WO 03/097627和WO 2012/101442中尤其描述了生产三麦芽酚铁的方法。

[0021] 在本发明中，受试者可以是人或非人动物，例如包含用于治疗如狗、猫和马等动物的兽医。

[0022] 根据本发明使用的麦芽酚铁组合物可以被配制成施用给个体并且含有除麦芽酚铁外的医药学上可接受的赋形剂、载体、缓冲液、稳定剂或本领域技术人员熟知的其它材料。此类材料应该是无毒的，并且不应该干扰麦芽酚铁的功效。

[0023] 载体或其它组分的确切性质可能与组合物的施用方式或途径有关。这些组合物可以通过一系列的递送途径进行递送，包含但不限于：胃肠道递送，包含口服和直肠施用；或通过在特定位点植入，包含用于此目的或主要用于其它目的但具有此益处的修复学。

[0024] 根据本发明制成的药物组合物通常用于口服施用并且可以呈片剂、胶囊、粉末、凝胶或液体形式。片剂可以包含如明胶等固体载体并且含有赋形剂。胶囊可以具有指定特性，如肠溶包衣。

[0025] 液体药物组合物通常包含液体载体，如水、石油、动植物油、矿物油或合成油。生理盐水溶液、葡萄糖或其它糖类溶液或如乙二醇、丙二醇或聚乙二醇等二醇类可以包含在内。

[0026] 根据本发明使用的提供给个体的麦芽酚铁组合物优选地以“预防性有效量”或“治疗有效量”(视情况而定，虽然预防可以被认为是治疗)施用，这足以示出有益于个体(例如，生物可用性和/或抗癌潜能)。所施用的实际量以及施用的速率和时间进程将取决于正治疗的性质和严重程度。治疗处方，如对剂量的决定等，由全科医师和其它医生负责，并且通常考虑到要治疗的障碍、个别病人的病状、递送位点、施用方法以及医师已知的其它因素。以上提及的技术和方案的实例可以在《雷明顿的药物科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)》，第20版，2000年，Lippincott,Williams&Wilkins中找到。组合物可以单独或与其它治疗结合同时或依次施用，这取决于治疗的病症。通常，向受试者口服施用麦芽酚铁组合物一天一次、一天两次、一天三次或一天四次。通常，所施用的剂量包括小于200mg/剂量的铁，优选地小于100mg/剂量，更优选小于70mg/剂量。麦芽酚铁组合物的剂量的优选实例包括作为麦芽酚铁的3mg/剂量到201mg/剂量的铁、优选地5mg/剂量到100mg/剂量、更优选地10mg/剂量到70mg/剂量、更优选地18mg/剂量到65mg/剂量、以及最优选地为18mg/剂量到65mg/剂量。

[0027] 本发明的麦芽酚铁组合物可以用于治疗或预防癌症或肿瘤，尤其是胃肠道癌症或肿瘤，如结肠直肠癌或肿瘤(在此意味着影响大肠的所有癌症或肿瘤，包含肛门、直肠、结肠、和盲肠的那些癌症或肿瘤)、小肠癌或肿瘤(在此意味着影响十二指肠、空肠或回肠的癌症或肿瘤)、或上消化道区域的癌症或肿瘤(在此意味着影响胃、食道、或口腔的癌症或肿瘤)。术语“胃肠癌或肿瘤”包含可以由本领域技术人员如专科医生和外科医生判断为以下病症的胃肠组织或胃肠组织区域：癌前、有癌症风险、癌性或带瘤。它包含肠的各种括约肌和胰/肝胆系统的方面，这些被本领域技术人员认为是胃肠系统的一部分。通常，口服施用麦芽酚铁组合物，尽管组合物可以被配制成使得靶向麦芽酚铁以递送到肠内，例如使用肠溶包衣将组合物引导到小肠或使用时间释放或响应于pH值或细菌等的包衣引导到大肠。麦芽酚铁的两亲性质支持其在肠道中任何地方被吸收。本发明的麦芽酚铁组合物可以用于治疗原发性或继发性癌症或肿瘤，并进入如胃肠道或肠肌层或淋巴结的上皮、粘膜或亚粘膜区域等层。癌症或肿瘤可以影响例如规则肠组织和细胞，包含与肠相关联的上述各层、淋巴组织和细胞、内分泌细胞、干细胞、基质细胞或淋巴结。

[0028] 一般来说，肠溶衣是在如片剂或胶囊等口服药剂上涂覆的减缓或防止其在胃环境中溶解或崩解的聚合物屏障。通过保护配制品的活性组分(在此麦芽酚铁组合物)潜在地降解胃酸或在胃之后释放活性组分来起作用。肠溶衣或其它这种包衣的使用使药物靶向能够实现，例如允许将活性组分递送到胃肠道中的不同位置。除使用肠溶衣外，通过以剂量形式将肠溶聚合物系统添加到基质中，例如以迷你片剂、丸剂和颗粒剂的形式，肠溶递送形式可以用于实现相同的效果。大多数肠溶衣通过在胃中找到的强酸pH下呈现稳定的表面但在较低酸性(相对较碱性)pH下迅速分解来起作用。例如，它们将不溶于胃酸(pH-3)，但它们将溶于小肠(small intestine)、小肠(small bowel)或大肠中存在的碱性环境(pH 4到9)。肠溶衣剂型到达肠内需要的时间主要取决于胃中存在的食物和食物类型以及包衣的选择。当活性组分到达肠内较低酸性、中性、或碱性环境时，其活性成分然后可以溶解并且在胃肠道中的目标作用位点变得可用。可替代地或另外地，可以采用在溶解胶囊或片剂以在肠道释放其内容之前具有时延的包衣，或者这些包衣可以在存在肠道的位点特异性组分如存在细菌的情况下作出响应并且溶解，由此使能够递送到更远端的小肠以及尤其包含直肠、结肠和盲肠的大肠。用于所有这些不同类型的针对口服递送的内容的肠道位点特异性释放的包衣的材料是本领域众所周知的并且包含但不限于脂肪酸、蜡、虫胶、塑料和植物纤维。所使用的其它常规材料是薄膜树脂溶液。

[0029] 时间释放组合物通常涉及活性组分配制品(此处指麦芽酚铁组合物)，通过将其嵌入一种或多种不溶性物质的基质，如但不限于丙烯酸或甲壳质，使得溶解的活性组分必需找到穿过基质中的孔而出来的路径。在一些时间释放配制品中，活性组分溶于基质中，并且基质物理膨胀以形成凝胶，从而允许活性组分通过凝胶的外表面离开。可以使用微囊化实现相似效果，这可以使更复杂的溶出曲线能够实现，例如通过惰性核周围的活性组分成分，并且用不溶性物质对其进行分层以形成一个微球通常可以以适宜的格式获得更一致且可重复溶解速率。除了本领域熟知的更常规的合成方式外，三维打印是一种实现这种复杂递送系统的公认方式。

[0030] 在一些实施例中，本发明的麦芽酚铁组合物可以组合使用或与为受试者提供的其它疗法结合使用，例如麦芽酚铁可以与外科手术、放射疗法、化学疗法、免疫疗法和/或其它靶向疗法组合使用。由于麦芽酚铁组合物耐受相对良好，这意味着它们可能与其它癌症疗法良好结合，所述癌症疗法中的许多疗法具有限制其单独使用或组合使用的副作用。

[0031] 作为口服递送麦芽酚铁组合物的替代方案，可能期望使麦芽酚铁组合物通过非口服方式递送，如经直肠、静脉、经皮或胃肠外递送。在一个实施例中，可以经由管道或内窥镜将麦芽酚铁化合物递送到胃肠道中的期望位点。

[0032] 在一些实施例中，麦芽酚铁化合物可用于预防受试者患癌症。任选地，这种预防性治疗还可以用于为缺铁、有缺铁风险或需要补铁的受试者提供治疗。举例来说，麦芽酚铁组合物可以用于在预防和治疗疑似或可以通过标准血液和临床化学技术诊断的缺铁或缺铁性贫血时将铁递送给个体。缺铁和缺铁性贫血可以单独发生，例如由于营养不足或由于过量铁损耗，或者其可能与如妊娠或哺乳等压力相关联，或者其可能与如炎性障碍、癌症和肾功能不全等疾病相关联。此外，证据表明，可以通过有效地递送全身性铁来改善或校正与慢性病贫血相关联的红细胞生成的减少，并且与促红细胞生成素或其类似物共同递送铁在克服减少的促红细胞生成活性方面可能特别有效。慢性病贫血可能与如肾功能不全、癌症和炎性障碍等病症相关联。如上所述，缺铁也可能在这些障碍中普遍发生，因此其遵循通过补充铁的治疗可以单独解决缺铁和/或慢性病贫血。特别有益的将是，将三麦芽酚铁施用给患有癌症或有患癌风险的患者，因为他们将患贫血或有患贫血的风险。本领域的技术人员将认识到，铁补充剂在医学上的用途的以上实例绝不是限制性的。

[0033] 实例

[0034] 材料与方法

[0035] 铁材料

[0036] 七水硫酸亚铁(FeSO4)和EDTA铁钠盐(FeEDTA)购自西格玛奥德里奇公司(Sigma Aldrich)。硫酸亚铁溶于酸化的超纯水中以产生40mM[Fe]储备溶液。EDTA铁溶于超纯水以产生8mM[Fe]储备溶液。通过以1:1的摩尔比将柠檬酸添加到氯化铁来产生柠檬酸铁(FeCitrate)8mM[Fe]的储备溶液。三麦芽酚铁(FTMB)由氢氧化铁和麦芽酚产生，并且通过将其溶解在超纯水中来产生约8mM[Fe]的储备溶液。将所有储备溶液过滤灭菌(0.2μm)。

[0037] 细胞培养

[0038] 使用了三种不同的上皮癌细胞系：结肠直肠腺癌[Caco2(ATCC)和HT29(ECAAC)]和十二指肠腺癌[Hutu 80(ATCC)]。使细胞在37℃和相对湿度约为95％的5％CO2和95％空气的气氛下在培养箱中生长。如所阐述的，癌细胞在补充有5％或10％胎牛血清(FBS)、1％青霉素/链霉素(10.000单位/ml青霉素，10.000μg/ml链霉素)和1％杀菌剂(两性霉素B，250μg/ml)的 MEM中生长。

[0039] 增殖测定

[0040] 通过在完全细胞生长培养基中稀释不同铁材料的储备溶液来在实验当天新鲜制备用于每种铁化合物的2mM[Fe]的工作溶液，并且在连续稀释中使用这些2mM溶液以在96孔ImageLock细胞培养板中产生用于增殖测定的8种不同浓度(0.89、0.49、0.27、0.15、0.08、0.05、0.026、0.015)。也测试了仅含完全生长培养基而不添加任何铁化合物的对照条件。以
10,000到20,000个细胞/孔的密度接种细胞。在活内容成像培养箱(Incucyte ZOOM,Essen BioScience Ltd.，英国)中孵育培养板，并且在接种后72小时内每3小时获取图像和汇合数据。在每个实验中，一式三份地测试孔中的每种铁浓度。

[0041] 数据分析

[0042] 获得针对每种铁化合物和每个浓度的汇合(％)与时间(小时)图。计算曲线下面积(AUC)，并针对每种测试化合物或对照的浓度作图。每种铁化合物的AUC针对其对照(即，仅完全生长培养基)标准化。

[0043] 结果

[0044] 在这一系列的三种不同的肠上皮癌细胞系中并且在两种不同的细胞培养条件(5％或10％FBS浓度)下，预期在具有铁补充物(图1到图3)的肠腔中发生的浓度下柠檬酸铁、EDTA铁和常用的铁补充剂、硫酸亚铁都促进细胞增殖。这与先前的体内数据一致，表明至少某些形式的铁在口服递送时可以促进肠肿瘤发生。相比之下并且令人惊讶的是，在典型的铁补充水平下，三麦芽酚铁在所有情况下实际上抑制癌细胞增殖(图1到图3)。

[0045] 有趣的是，在不与铁结合的情况下，麦芽酚分子本身示出中度抑制癌细胞增殖，并且在此方面，当不与铁结合时非常类似于EDTA的效果(图1到图3)。然而，尤其令人惊讶的是，虽然EDTA效果实际上通过其与铁结合而减弱，但麦芽酚作用增强。换句话说，数据示出，当与铁结合时，用于补铁的这两种螯合物在其癌细胞抑制特性方面显示出极性效应。

[0046] 当回顾实时记录的细胞图像时，显然，Caco2和HT29细胞与作为三麦芽酚铁的50微摩尔铁增殖不良并且与作为三麦芽酚铁的80微摩尔铁不增殖。对于十二指肠腺癌(Hutu 80)细胞，这些数字分别是150微摩尔和400微摩尔。因此，可以使用可能在正常补充铁时在肠腔中找到的水平的三麦芽酚铁来阻止或至少抑制癌细胞增殖。甚至400微摩尔水平将可在更高的补充水平和/或如上所述的特异性靶向肠中的麦芽酚铁组合物的情况下实现。这将有益于人和其它动物受试者。

[0047] _________________

[0048] 参考文献

[0049] 本文引用的或随本申请一起提交的所有出版物、专利和专利申请，包含作为信息公开声明的一部分提交的参考文献，通过引用以其全文结合在此。

[0050] 1.硫酸亚铁补充物对成人造成显著的胃肠副作用：系统回顾和元分析。Tolkien Z、Stecher L、Mander AP、Pereira DI、Powell JJ，PLoS One，2015年2月20日；第10卷，第2期：e0117383.doi:10.1371/journal.pone.0117383.eCollection 2015.综述。

[0051] 2.评估口服硫酸亚铁补充物后胃肠道症状的快速、简单问卷Pereira DI、Couto Irving SS、Lomer MC、Powell JJ，《BMC胃肠病学(BMC Gastroenterol.)》，2014年6月4日；14:10 3.doi:10.1186/1471-230X-14-103

[0052] 3.体内Ape丧失后腔内铁水平控制肠肿瘤的产生Radulescu S、Brookes MJ、Salgueiro P、Ridgway RA、McGhee E、Anderson K、Ford SJ、Stones DH、Iqbal TH、Tselepis C、Sansom OJ，《细胞报告(Cell Rep.)》，2012年8月30日；第2卷，第2期：27 0-82.doi:10.1016/j.celrep.2012.07.003.电子版2012年8月9日

[0053] 4.全身补铁补充铁储备，而不增加溃疡性结肠炎的小鼠模型中结肠癌的发生：与富含铁的饮食相比Seril DN、Liao J、Yang CS、Yang GY，《消化道疾病科学(Dig Dis Sci.)》，2005年4月，第50卷，第4期，第696到707页

[0054] 5.Bruggraber SFA、Hider RC和Powell JJ，由电喷雾离子化质谱分析法定义的铁-麦芽酚形态模型是否适合分光光度法/电位测定法数据？In Pele L、Powell JJ、Kinrade S、Jugdaohsingh R、Collery P、Maymard I和Badawi A(编辑)，《生物学和医学中的金属离子(Metal Ions in Biology and Medicine)》，第II卷，John Libbey Eurotext，巴黎，2011年，第158到163页。

[0055] 6.Bruggraber SFA、Langley G和Powell JJ，离子络合物的直接识别(III)，In Pele L、Powell JJ、Kinrade S、Jugdaohsingh R、Collery P、Maymard I和Badawi A.(编辑)，《生物学和医学中的金属离子(Metal Ions in Biology and Medicine)》，第11卷，John Libbey Eurotext,巴黎，2011年，第152到157页。

[0056] 7.麦芽酚铁能有效地校正患有炎症性肠病的患者的缺铁性贫血：来自3期临床试验项目的结果。Gasche C、Ahmad T、Tulassay Z、Baumgart DC、Bokemeyer B、Büning C、Howaldt S、Stallmach A；AEGIS研究组《，炎症性肠病(Inflamm Bowel Dis.)》，2015年3月；第21卷，第3期，第579到588页。

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