技术领域
[0001] 本
发明属于生物技术领域。更具体地，涉及一种护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白。
背景技术
[0002] 酒是人类生活中的主要饮料之一，中国制酒历史源远流长，品种繁多，名酒荟萃，享誉中外，在中国人生活中都占有重要的
位置。
[0003] 饮酒尤其是大量饮酒具有诸多的危害，如酒精中毒、伤肝、伤胃、增加食道管癌的患病几率；身体解酒能
力不行的话，喝酒加快血压上升，引起心功能衰竭甚至猝死；醉酒容易引起交通事故，经常喝酒容易面色枯黄，暗淡没有光彩，容颜衰老，损害
机体解酒能力和排毒能力，降低
疾病抵抗力。
[0004] 据报道，如葛根、枳椇子等也有解酒、防酒精中毒的功效。但是目前，市场上有多种声称的解酒护肝产品，包括食品性冲剂、中药制剂、养生茶饮料等，但是效果多差强人意。而中药口味差，虽然是中药，但毕竟是药物，所谓是药三分毒，接受度受限。
发明内容
[0005] 本发明要解决的技术问题是克服现有解酒护肝产品的
缺陷和不足，提供一种具有解酒护肝作用的纯生物食品制剂，原料均为可食用的食品原料，安全无
副作用；更重要的是，经过合理的复配及加工工艺，经过实验和应用案例证明，所得产品护肝、解酒效果显著，防止酒精对肝脏的损伤。
[0006] 本发明的目的是提供一种护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白。
[0007] 本发明上述目的通过以下技术方案实现：
[0008] 一种护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白，由如下
质量比的组分制成：蚕蛹蛋白70～85%、桑葚粉8～17%、枳椇子提取物5～10%、葛根粉2～5%。
[0009] 优选地，所述护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白由如下质量比的组分制成：蚕蛹蛋白78～82%、桑葚粉10～12%、枳椇子提取物5～9%、葛根粉2～4%。
[0010] 更优选地，所述护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白由如下质量比的组分制成：蚕蛹蛋白80%、桑葚粉10%、枳椇子提取物7%、葛根粉3%。
[0011] 另外，优选地，所述桑葚粉为桑葚冻干粉。
[0012] 更优选地，所述桑葚冻干粉由如下方法制备得到：
[0013] S1.原料处理：选择新鲜、饱满、无病害的桑葚，清洗干净后，40-50℃
真空干燥6-8h；
[0014] S2.
粉碎：干燥后的桑葚粉碎至50-60目；
[0015] S3.真空
冷冻干燥：将粉碎所得桑葚粉装入干燥容器中，厚度约为3cm-4cm，然后在无菌条件下-40℃、-0.6-0.7Mpa真空冷冻干燥15-20h，得到桑葚冻干粉。
[0016] 优选地，所述蚕蛹蛋白的制备方法为：
[0017] （1）将新鲜蚕蛹用
水清洗、除去蛹皮等杂质后，液氮
研磨成粗粉，过50-60目筛；
[0018] （2）
脱脂：以石油醚为
溶剂进行重复脱脂处理5-6次；
[0019] （3）脱脂处理后的蚕蛹粗粉75-85℃烘干至
含水量6-8%，继续粉碎、过110-120目筛，得脱脂蚕蛹粉末；
[0020] （5）将上述脱脂蚕蛹粉末均匀分散质量浓度1.5%的氢
氧化钠溶液中，55-65℃水浴浸提12-15h，过滤去除滤渣，得滤液；
[0021] （6）滤液用1mol/L
盐酸调节pH至4.0-4.5后，1-4℃
冰水浴中静置沉淀4-6h，离心得沉淀物；
[0022] （7）沉淀物进行脱色、除臭处理，得到蚕蛹蛋白粉末。
[0023] 优选地，所述枳椇子提取物的制备方法为：
[0024] （1）取枳椇子
破碎成粗粉，粗粉置提取罐内加4倍量75％
乙醇，60-70℃回流煮提3-4次，每次3-4h；
[0025] （2）提取液合并后浓缩，再烘干至含水量10-15%；
[0026] （3）步骤（2）的产物在50-60℃条件下100-150W超声处理2-3h；
[0027] （4）超声处理后的产物粗粉碎至80-100目，再经细微粉碎至30-50目，70-75℃烘干3-4h，得到枳椇子提取物粉末。
[0028] 优选地，所述葛根粉的制备方法为：取葛根洗净，粉碎至100-120目，然后加入4-5倍量的水中，搅拌过滤，重复3-4次，合并滤液，静置沉淀12-24h，所得沉淀物干燥至50-55℃烘干5-8h，再细微粉碎至30-50目，即得葛根粉。
[0029] 本发明提供的护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白是将各组分原料消毒后、粉碎、混合均匀、卷膜、紫外灭菌、内包、过金检、外包、成品检测、辐照制成。
[0030] 另外，上述蚕蛹提取生物蛋白在制备护肝解酒制剂方面的应用，以及以所述蚕蛹提取生物蛋白为原料之一制成的护肝解酒制剂，均应在本发明的保护范围之内。所述制剂可以为食品、饮料、保健品或药品。
[0031] 本发明具有以下有益效果：
[0032] 本发明提供了一种具有解酒护肝作用的纯生物食品制剂，原料均为可食用的食品原料，安全无副作用；更重要的是，经过合理的复配及加工工艺，经实验和应用案例证明，所得产品护肝、解酒效果显著，防止酒精对肝脏的损伤；而且研究证实，喝酒前食用本发明的蚕蛹提取生物蛋白，不易醉。
[0033] 而且，本发明的蚕蛹提取生物蛋白粉末产品经过大量的感官评价，无任何不适异味，口感好，可直接食用，也可溶于水中饮用，
溶解度好，还可适用于制备各种解酒护肝的食品、饮料、保健品或药品等，具有非常好的应用前景。
具体实施方式
[0034] 以下结合具体
实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的
试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
[0035] 除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
[0036] 实施例1
[0037] 1、一种护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白，由如下质量比的组分制成：蚕蛹蛋白80%、桑葚粉10%、枳椇子提取物7%、葛根粉3%。
[0038] 将各组分原料消毒后、超微细粉碎至30-50目、按质量比混合均匀、卷膜、紫外灭菌、内包、过金检、外包、成品检测、辐照、入库，即制成所述护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白成品。
[0039] 2、上述配方中，所述桑葚为桑葚冻干粉，制备方法如下：
[0040] S1.原料处理：选择新鲜、饱满、无病害的桑葚，清洗干净后，40-50℃真空干燥6-8h；
[0041] S2.粉碎：干燥后的桑葚粉碎至50-60目；
[0042] S3.真空冷冻干燥：将粉碎所得桑葚粉装入干燥容器中，厚度约为3cm-4cm，然后在无菌条件下-40℃、-0.6-0.7Mpa真空冷冻干燥15-20h，得到桑葚冻干粉。
[0043] 所述蚕蛹蛋白的制备方法如下：
[0044] （1）将新鲜蚕蛹用水清洗、除去蛹皮等杂质后，液氮研磨成粗粉，过50-60目筛；
[0045] （2）脱脂：以石油醚为溶剂进行重复脱脂处理5-6次；
[0046] （3）脱脂处理后的蚕蛹粗粉75-85℃烘干至含水量6-8%，继续粉碎、过110-120目筛，得脱脂蚕蛹粉末；
[0047] （5）将上述脱脂蚕蛹粉末均匀分散质量浓度1.5%的氢氧化钠溶液中，55-65℃水浴浸提12-15h，过滤去除滤渣，得滤液；
[0048] （6）滤液用1mol/L盐酸调节pH至4.0-4.5后，1-4℃冰水浴中静置沉淀4-6h，离心得沉淀物；
[0049] （7）沉淀物进行脱色、除臭处理，得到蚕蛹蛋白粉末。
[0050] 所述枳椇子提取物的制备方法如下：
[0051] （1）取枳椇子破碎成粗粉，粗粉置提取罐内加4倍量75％乙醇，60-70℃回流煮提3-4次，每次3-4h；
[0052] （2）提取液合并后浓缩，再烘干至含水量10-15%；
[0053] （3）步骤（2）的产物在50-60℃条件下100-150W超声处理2-3h；
[0054] （4）超声处理后的产物粗粉碎至80-100目，再经细微粉碎至30-50目，70-75℃烘干3-4h，得到枳椇子提取物粉末。
[0055] 所述葛根粉的制备方法为：取葛根洗净，粉碎至100-120目，然后加入4-5倍量的水中，搅拌过滤，重复3-4次，合并滤液，静置沉淀12-24h，所得沉淀物干燥至50-55℃烘干5-8h，再细微粉碎至30-50目，即得葛根粉。
[0056] 实施例2
[0057] 一种护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白，由如下质量比的组分制成：蚕蛹蛋白78%、桑葚粉10%、枳椇子提取物8%、葛根粉4%。
[0058] 制备工艺同实施例1。
[0059] 实施例3
[0060] 一种护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白，由如下质量比的组分制成：蚕蛹蛋白82%、桑葚粉10%、枳椇子提取物5%、葛根粉3%。
[0061] 制备工艺同实施例1。
[0062] 实施例4
[0063] 一种护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白，由如下质量比的组分制成：蚕蛹蛋白70%、桑葚粉17%、枳椇子提取物8%、葛根粉5%。
[0064] 制备工艺同实施例1。
[0065] 实施例5
[0066] 一种护肝解酒蚕蛹提取生物蛋白，由如下质量比的组分制成：蚕蛹蛋白85%、桑葚粉8%、枳椇子提取物5%、葛根粉2%。
[0067] 制备工艺同实施例1。
[0068] 实施例6 产品解酒护肝效果研究
[0069] 以实施例1的蚕蛹提取生物蛋白为例，研究其解决护肝功效。
[0070] 一、解酒防醉动物药效学评价实验
[0071] 1、实验材料
[0072] 实验小白鼠，体重21±1g。白酒，给酒时用蒸馏水稀释成35度。实施例1蚕蛹提取生物蛋白。
[0073] 2、实验方法
[0074] 2.1解酒醉药效学实验
[0075] 3批小白鼠经过5天的环境适应后，随机分成若干组，雌雄各半，每组待试小鼠禁食过夜(约12～14h)，次日以40度酒0.37mL/21g鼠重的剂量给酒，20min后分别以生理盐水、蚕蛹提取生物蛋白
给药，给药量均为0.40mL/21g鼠重(即建议人体摄入量的60倍)。
[0076] 第一批实验评价急性酒精中毒小鼠酒后醉倒率及其耐受时间和维持时间：给酒后即开始计时，分别记录小白鼠醉倒数及其翻正反射消失时间和恢复时间，计算小鼠酒后醉倒率及其耐受时间和维持时间。
[0077] 第二批实验评价急性酒精中毒小鼠血液中乙醇含量和SOD酶活：给酒后90min摘眼球取血，用0.3mL 3.8%
柠檬酸三钠溶液抗凝血，气相色谱法测定鼠血乙醇含量和邻苯三 酚自氧化法测定SOD酶活。
[0078] 第三批实验评价慢性酒精中毒小鼠酒精性肝损伤情况：经过连续30天的给药给酒实验后，每组待试小鼠禁食12h，次日解剖小鼠，观察内脏器官病变情况，取肝脏进行肝匀浆后测定LPO含量。
[0079] 2.2防酒醉药效学实验
[0080] 动物实验设计同方法2.1，但改成先给药，20min后再给酒，给酒后即开始计时。第一批实验评价急性酒精中毒小鼠酒后醉倒率及其耐受时间和维持时间；第二批实验评价急性酒精中毒小鼠血液中乙醇含量和SOD酶活；第三批实验评价慢性酒精中毒小鼠酒精性肝损伤情况。
[0081] 3、药剂解酒醉药效学实验结果
[0082] 3.1急性酒精中毒小鼠药效学评价结果
[0083] 急性酒精中毒小鼠酒后醉倒率及其耐受时间和维持时间，血液中乙醇含量和SOD酶活如表1所示。
[0084] 表1 解酒醉药效(酒后给药)(X±SD)n＝36
[0085]
[0086] 经t检验与生理盐水对照组比较，**：P＜0.01。
[0087] 实验结果显示，酒后摄入本发明的蚕蛹提取生物蛋白可有效地减轻醉酒和缩短醉酒维持时间，能延缓乙醇吸收、促进乙醇代谢，有效地降低血液中乙醇的浓度，能有效地提高血液中SOD酶活，阻止SOD清除机体内自由基能力的下降，有利于减轻乙醇及其代谢中间产物对动物体的损伤，起到明显的解酒效果。
[0088] 3.2慢性酒精中毒小鼠酒精性肝损伤情况
[0089] 以小鼠肝匀浆的LPO值进行测评，结果如表2所示。
[0090] 表2护肝药效(酒后给药)(X±SD)n＝36
[0091]
[0092] 经t检验与阳性对照组比较，**：P＜0.01。
[0093] 实验结果显示，阳性对照组小鼠在连续给酒28天后肝匀浆的LPO值较高，表明长期大量摄入酒精将造成酒精性肝损伤。给药组小鼠肝匀浆LPO明显较低，表明本发明的蛋白产品具有较好的抗氧化和保肝功能，有助于提高动物体内自由基的清除能力，降低其脂质过氧化速度，从而减轻长期大量饮酒造成的酒精性肝损伤。
[0094] 4、防醉药效学结果
[0095] 急性酒精中毒小鼠酒后醉倒率及其耐受时间和维持时间、血液中乙醇含量和SOD酶活如表3所示。
[0096] 表3 防酒醉药效(酒前给药)(X±SD)n＝36
[0097]
[0098] 经t检验与生理盐水对照组比较，**P＜0.01。
[0099] 实验结果显示，与生理盐水对照组比较，饮酒前摄入本发明的蛋白产品，小鼠酒后醉倒率明显降低，酒后90min时血醇含量均有不同程度的降低和SOD酶活均有不同程度的升高；给药组可有效地防止醉酒和缩短醉酒时间，显示出明显的防醉药效。
[0100] 实施例7 产品应用案例
[0101] 1、选择身体健康、无酒精过敏、体重约60kg的人群，每人在20min内喝下3瓶
啤酒后，选取醉酒程度相似的40人，随机分为对照组和试验组。
[0102] 分组后试验组服用实施例1的蚕蛹提取生物蛋白100g，对照组不服用，隔一段时间测量血液中的酒精含量(mg/100ml)。
[0103] 2、结果如表4所示
[0104] 表4 不同时间段血液中的乙醇浓度(mg/100ml)
[0105]
[0106] 如表4所示，试验组人群的血液中乙醇浓度显著低于对照组，说明本发明的蚕蛹提取生物蛋白具有良好的解酒效果。
[0107] 另外，根据志愿者的试用，酒前服用效果更好，从开始喝酒至喝醉所用的时间更久，醉酒后头晕、恶心、呕吐等症状有较大缓解，且酒后第二天无任何不适症状，有效率达85%以上。
[0108] 实施例8 复配组分的优化筛选
[0109] 选取不同的食品级原料：蚕蛹蛋白、桑葚粉、枳椇子提取物、葛根、决明子、杮子、杨桃、绿豆、
甘蔗，制成粉末或提取物粉末后，按照表5进行复配。然后按照实施例6的方法研究各组解酒的效果。结果如表6所示。
[0110] 表5
[0111]
[0112] 表6
[0113]
[0114] 由实验结果可知，蚕蛹蛋白、桑葚粉、枳椇子提取物、葛根粉的特定复配合理，发挥了显著的协同增效作用。
[0115] 实施例9 组分配比对功效的影响
[0116] 首先分别以蚕蛹蛋白、桑葚粉、枳椇子提取物、葛根粉的用量比为单因素变量，其他组分用量比同实施例1，按照实施例1的制备工艺得到一系列生物蛋白产品，按照实施例6的实验方法优化各组分的配比。然后在单因素变量的
基础上，利用
正交实验进一步优化各组分的配比。
[0117] 结果显示，蚕蛹蛋白：桑葚粉：枳椇子提取物：葛根粉=70～85：8～17：5～10：2～5的质量比进行复配，解酒护肝效果最好。进一步地，蚕蛹蛋白：桑葚粉：枳椇子提取物：葛根粉质量比优选为78～82：10～12：5～9：2～4，最佳配比为80：10：7：3。
[0118] 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
